ఫోర్డైరెక్ట్ RT-qPCR కిట్
కిట్ వివరణ:
◮RNA శుద్ధి ప్రక్రియలు లేకుండా స్వాబ్ సేకరణల నుండి RNA ప్రత్యక్ష నిజ-సమయ విస్తరణ కోసం.ఈ కిట్ qRT-PCR చక్రాలను ఒక గంటలోపు పూర్తి చేస్తుంది.ఎంజైమ్ మిక్స్ అనేది రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్టేజ్, హాట్-స్టార్ట్ టాక్ DNA పాలిమరేస్, RNase ఇన్హిబిటర్ యొక్క ఆప్టిమైజ్ చేసిన మిశ్రమం.రియాక్షన్ బఫర్ ఆప్టిమైజ్ చేయబడిన బఫర్ భాగాలు, Mgతో సహా అవసరమైన అన్ని భాగాలను కలిగి ఉంది2+, dUTP మరియు dNTPలు.
వివరణ
ఫోర్డైరెక్ట్ RT-qPCR కిట్ RNA శుద్ధి ప్రక్రియలు లేకుండా స్వాబ్ సేకరణల నుండి RNA ప్రత్యక్ష నిజ-సమయ విస్తరణ కోసం రూపొందించబడింది.ఈ కిట్ qRT-PCR చక్రాలను ఒక గంటలోపు పూర్తి చేస్తుంది.ఎంజైమ్ మిక్స్ అనేది రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్టేజ్, హాట్-స్టార్ట్ టాక్ DNA పాలిమరేస్, RNase ఇన్హిబిటర్ యొక్క ఆప్టిమైజ్ చేసిన మిశ్రమం.రియాక్షన్ బఫర్ ఆప్టిమైజ్ చేయబడిన బఫర్ భాగాలు, Mgతో సహా అవసరమైన అన్ని భాగాలను కలిగి ఉంది2+, dUTP మరియు dNTPలు.
స్పెసిఫికేషన్లు
100T
కిట్ భాగాలు
| న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ విడుదల ఏజెంట్ |
| RNA రక్షకుడు |
| 2× RT-qPCR బఫర్ |
| ఎంజైమ్ మిశ్రమం(Taq&M-MLV) |
| సూచనలు |
PCR అప్లికేషన్
1. PCR రియాక్షన్ ట్యూబ్‌లు క్లుప్తంగా సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయబడిన తర్వాత, వాటిని యాంప్లిఫికేషన్ పరికరం యొక్క నమూనా ట్యాంక్‌లో ఉంచండి.
2. థర్మల్ ప్రోటోకాల్
| దశ | ఉష్ణోగ్రత | సమయం | సైకిళ్లు | |
| 1 | రివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్షన్ | 50℃ | 15 నిమిషాలు | 1 |
| 2 | ప్రీ-డినాటరేషన్ | 95℃ | 1 నిమిషం | 1 |
| 3 | డీనాటరేషన్ | 95℃ | 10 సెకన్లు | 42 |
| 4 | అన్నేల్/ఎక్స్‌టెన్షన్ | 60℃ | 30 సెకన్లు | |
గమనిక:ప్రతి చక్రం యొక్క పొడిగింపు దశ తర్వాత వెంటనే ఫ్లోరోసెంట్ సిగ్నల్ కనుగొనబడింది.
3. సెట్ చేసిన తర్వాత, ఫైల్‌ను సేవ్ చేసి, ప్రతిచర్య ప్రోగ్రామ్‌ను అమలు చేయండి.
ఆపరేటింగ్ దశలు
రియాజెంట్ తయారీకి ముందు, కిట్‌లోని అన్ని రియాజెంట్‌లను గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద కరిగించి, మెత్తగా కలపాలి.
రియాజెంట్ తయారీ
1. న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ విడుదల మిశ్రమాన్ని సిద్ధం చేయండి
| భాగం | ప్రతి నమూనా లేదా నియంత్రణకు వాల్యూమ్ |
| న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ విడుదల ఏజెంట్ | 5μL |
| RNA రక్షకుడు | 0.5 μL |
2. ప్రతిచర్య మిశ్రమాన్ని సిద్ధం చేయండి
| భాగం | ప్రతి నమూనా లేదా నియంత్రణకు వాల్యూమ్ |
| 2× RT-qPCR బఫర్ | 15 μL |
| ఎంజైమ్ మిశ్రమం(Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
| ప్రైమర్లు మరియు ప్రోబ్స్ | 1μL |
నిల్వ మరియు షెల్ఫ్ జీవితం
-కిట్ -20 వద్ద నిల్వ చేయాలి± 5℃.చెల్లుబాటు వ్యవధి 12 నెలలు.
-రిపీట్ ఫ్రీజ్-థా సైకిల్స్ (<5 సైకిల్స్) మానుకోండి.
