యానిమల్ టోటల్ ఆర్‌ఎన్‌ఏ ఐసోలేషన్ కిట్ టోటల్ ఆర్‌ఎన్‌ఏ ఎక్స్‌ట్రాక్షన్ మరియు యానిమల్ టిష్యూస్ & సెల్ కోసం ప్యూరిఫికేషన్ కిట్లు
కిట్ వివరణ:
వివిధ జంతు కణజాలాల నుండి అధిక-స్వచ్ఛత మరియు అధిక-నాణ్యత మొత్తం RNAను త్వరగా మరియు సమర్ధవంతంగా సంగ్రహించండి.
RNA క్షీణత గురించి ఆందోళన చెందాల్సిన అవసరం లేదు.మొత్తం సిస్టమ్ RNase-ఉచితం
DNA-క్లీనింగ్ కాలమ్‌ని ఉపయోగించి DNAని సమర్థవంతంగా తొలగించండి
DNaseని జోడించకుండా DNAని తీసివేయండి
సాధారణ-అన్ని కార్యకలాపాలు గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద పూర్తవుతాయి
ఫాస్ట్-ఆపరేషన్ 30 నిమిషాల్లో పూర్తి అవుతుంది
సురక్షితమైనది-ఏ ఆర్గానిక్ రియాజెంట్ ఉపయోగించబడలేదు
అధిక స్వచ్ఛత-OD260/280≈1.8-2.1
కిట్ వివరణలు
50 ప్రిపరేషన్, 200 ప్రిపరేషన్
ఈ కిట్ ఉపయోగిస్తుందిస్పిన్ కాలమ్ మరియు ఫార్ములామా కంపెనీ ద్వారా అభివృద్ధి చేయబడింది, ఇది వివిధ జంతు కణజాలాల నుండి అధిక సామర్థ్యంతో అధిక-స్వచ్ఛత మరియు అధిక-నాణ్యత మొత్తం RNAను సంగ్రహించగలదు. ఇది సమర్థవంతమైన DNA-క్లీనింగ్ కాలమ్‌ను అందిస్తుంది, ఇది సూపర్‌నాటెంట్ మరియు టిష్యూ లైసేట్ నుండి జన్యుసంబంధమైన DNAని సులభంగా వేరు చేయగలదు మరియు శోషించగలదు, సరళమైనది మరియు సమయాన్ని ఆదా చేస్తుంది;RNA-మాత్రమే కాలమ్ RNAని సమర్ధవంతంగా బంధించగలదు మరియు అనేక నమూనాల ప్రత్యేక సూత్రంతో ఏకకాలంలో ప్రాసెస్ చేయబడుతుంది.
మొత్తం వ్యవస్థ RNase-రహితంగా ఉంటుంది, తద్వారా సంగ్రహించబడిన RNA క్షీణించబడదు;బఫర్ RW1, బఫర్ RW2 బఫర్ వాషింగ్ సిస్టమ్, తద్వారా పొందిన RNA ప్రోటీన్, DNA, అయాన్ మరియు సేంద్రీయ సమ్మేళనం కాలుష్యం లేకుండా ఉంటుంది.
కిట్ భాగాలు
| యానిమల్ టోటల్ RNA ఐసోలేషన్ కిట్ | ||
| కిట్ భాగాలు | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 టి | 200 టి | |
| బఫర్ RL1* | 25మి.లీ | 100మి.లీ |
| బఫర్ RL2 | 15మి.లీ | 60మి.లీ |
| బఫర్ RW1* | 25మి.లీ | 100మి.లీ |
| బఫర్ RW2 | 24మి.లీ | 96మి.లీ |
| RNase-ఉచిత ddH2O | 10మి.లీ | 40మి.లీ |
| RNA-మాత్రమే కాలమ్ | 50 | 200 |
| DNA-క్లీనింగ్ కాలమ్ | 50 | 200 |
| సూచన పట్టిక | 1 ముక్క | 1 ముక్క |
ఉత్పత్తి సమాచారం
| ఫార్మాట్ | స్పిన్ కాలమ్ | శుద్దీకరణ భాగం | ఫోర్జీన్ కాలమ్, రియాజెంట్ |
| ఫ్లక్స్ | 1-24 నమూనాలు | ప్రిపరేషన్‌కు సమయం | ~30 నిమి (24 నమూనాలు) |
| సెంట్రిఫ్యూజ్ | డెస్క్ సెంట్రిఫ్యూజ్ | పైరోలిసిస్ వేరు | అపకేంద్ర విభజన |
| నమూనా | జంతు కణజాలం;సెల్ | నమూనాల మొత్తం | కణజాలం:10-20 mg;సెల్:(1-5)×106 |
| ఎలుషన్ వాల్యూమ్ | 50-200 μL | గరిష్ట లోడ్ వాల్యూమ్ | 850 μL |
ఫీచర్లు & ప్రయోజనాలు
■ RNA క్షీణత గురించి ఆందోళన చెందాల్సిన అవసరం లేదు;మొత్తం సిస్టమ్ RNase-ఉచితం
■ DNA-ఉపయోగించి DNA-క్లీనింగ్ కాలమ్‌ను సమర్థవంతంగా తొలగించండి
■ DNaseని జోడించకుండా DNAని తీసివేయండి
■ సాధారణ-అన్ని కార్యకలాపాలు గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద పూర్తవుతాయి
■ ఫాస్ట్-ఆపరేషన్ 30 నిమిషాల్లో పూర్తి అవుతుంది
■ సేఫ్-ఏ ఆర్గానిక్ రియాజెంట్ అవసరం లేదు
■ అధిక స్వచ్ఛత -OD260/280≈1.8-2.1
కిట్ అప్లికేషన్
వివిధ రకాల తాజా లేదా ఘనీభవించిన జంతు కణజాలం లేదా కల్చర్డ్ కణాల నుండి మొత్తం RNA యొక్క వెలికితీత మరియు శుద్ధీకరణకు ఇది అనుకూలంగా ఉంటుంది.
ఉత్పత్తి పారామితులు
■ డౌన్‌స్ట్రీమ్ అప్లికేషన్‌లు: ఫస్ట్-స్ట్రాండ్ cDNA సింథసిస్, RT-PCR, మాలిక్యులర్ క్లోనింగ్, నార్తర్న్ బ్లాట్, మొదలైనవి.
■ నమూనాలు: జంతు కణజాలాలు, కల్చర్డ్ కణాలు
■ మోతాదు: కణజాలాలు 10-20mg, కణాలు(2-5)×106
■ శుద్దీకరణ కాలమ్ యొక్క గరిష్ట DNA బైండింగ్ సామర్థ్యం: 80 μg
■ ఎల్యూషన్ వాల్యూమ్: 50-200 μl
రేఖాచిత్రం
యానిమల్ టోటల్ RNA ఐసోలేషన్ కిట్ 20mg చికిత్స చేయబడింది
తాజా మౌస్ నమూనాలు, 5% శుద్ధి చేయబడిన మొత్తం RNA 1% అగర్ తీసుకోండి
గ్లైకోజెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్
1: ప్లీహము 2: కిడ్నీ
3: కాలేయం 4: గుండె
నిల్వ మరియు షెల్ఫ్ జీవితం
కిట్‌ను గది ఉష్ణోగ్రత (15–25 ℃) లేదా 2–8 ℃ వద్ద 24 నెలలు నిల్వ చేయవచ్చు.బఫర్ RL1 β- మెర్కాప్టోఇథనాల్ (ఐచ్ఛికం) జోడించిన తర్వాత 1 నెల వరకు 4 ℃ వద్ద నిల్వ చేయబడుతుంది.
ఉదహరించిన కథనాలు
1.IF:18.808:జెంగ్, Q., క్విన్, F., లువో, R., మరియు ఇతరులు.సెంట్రల్ కాంపోజిట్ డిజైన్ ఆప్టిమైజేషన్ ద్వారా లివర్ బేస్ ఎడిటింగ్ కోసం mRNA-లోడెడ్ లిపిడ్ లాంటి నానోపార్టికల్స్.అడ్వా.ఫంక్షన్.మేటర్.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.IF:18.187:అతను X, హాంగ్ W, యాంగ్ J, మరియు ఇతరులు.చికిత్సా మూలకణాల తయారీలో కణాల యొక్క ఆకస్మిక అపోప్టోసిస్ ఫాస్ఫాటిడైల్సెరిన్ విడుదల ద్వారా ఇమ్యునోమోడ్యులేటరీ ప్రభావాలను చూపుతుంది.సిగ్నల్ ట్రాన్స్‌డక్ట్ టార్గెట్ థెర్.2021 జూలై 14;6(1):270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.IF:17.97:Dai Z, Liu H, Liao J, et al.N7-Methylguanosine tRNA సవరణ ఆంకోజెనిక్ mRNA అనువాదాన్ని మెరుగుపరుస్తుంది మరియు ఇంట్రాహెపాటిక్ చోలాంగియోకార్సినోమా పురోగతిని ప్రోత్సహిస్తుంది.మోల్ సెల్.2021 జూలై 29:S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.IF:9.225:కావో ఎక్స్, షు వై, చెన్ వై, మరియు ఇతరులు.Mettl14-మెడియేటెడ్ m6A సవరణ ఎండోప్లాస్మిక్ రెటిక్యులం హోమియోస్టాసిస్‌ను నిర్వహించడం ద్వారా కాలేయ పునరుత్పత్తిని సులభతరం చేస్తుంది.సెల్ మోల్ గ్యాస్ట్రోఎంటరాల్ హెపాటోల్.2021;12(2):633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
RNA ఐసోల్షన్ కిట్లు ఇతర నమూనా మూలాలుఅందుబాటులో ఉన్నాయి:
కణం, మొక్క, వైరల్, రక్తం మొదలైనవి.
RNA సంగ్రహించబడలేదు లేదా RNA దిగుబడి తక్కువగా ఉంటుంది
రికవరీ సామర్థ్యాన్ని ప్రభావితం చేసే అనేక రకాల కారకాలు తరచుగా ఉన్నాయి, అవి: కణజాల నమూనా RNA కంటెంట్, ఆపరేషన్ పద్ధతి, ఎలుషన్ వాల్యూమ్ మొదలైనవి.
1. ఆపరేషన్ సమయంలో ఐస్ బాత్ లేదా క్రయోజెనిక్ (4 °C) సెంట్రిఫ్యూగేషన్ జరిగింది.
సిఫార్సు: మొత్తం ప్రక్రియలో గది ఉష్ణోగ్రత (15-25 ° C) వద్ద పని చేయండి, తక్కువ ఉష్ణోగ్రతల వద్ద మంచు స్నానం మరియు సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయవద్దు.
2. సరికాని నమూనా సంరక్షణ లేదా అధిక నమూనా నిల్వ సమయం.
సిఫార్సు: నమూనాలను -80 °C వద్ద నిల్వ చేయండి లేదా ద్రవ నత్రజనిలో స్తంభింపజేయండి మరియు పదేపదే ఫ్రీజ్-థా వినియోగాన్ని నివారించండి;RNA వెలికితీత కోసం తాజా కణజాలం లేదా కల్చర్డ్ కణాలను ఉపయోగించడానికి ప్రయత్నించండి.
3. సరిపోని నమూనా లైసిస్.
సిఫార్సు: కణజాలాన్ని సజాతీయీకరించేటప్పుడు, కణజాలం తగినంతగా సజాతీయంగా ఉందని మరియు RNA విడుదలను వివరించడానికి కణజాల కణాలు తగినంతగా విభజించబడిందని నిర్ధారించుకోండి.
4. ఎలుయెంట్ సరిగ్గా జోడించబడలేదు.
సిఫార్సు: RNase-Free ddH అని నిర్ధారించండి2శుద్దీకరణ కాలమ్ మెమ్బ్రేన్ మధ్యలో O డ్రాప్‌వైస్‌గా జోడించబడింది.
5. సంపూర్ణ ఇథనాల్ యొక్క సరైన వాల్యూమ్ బఫర్ RL2 లేదా బఫర్ RW2కి జోడించబడలేదు.
సిఫార్సు: సూచనలను అనుసరించండి, బఫర్ RL2 మరియు బఫర్ RW2కి సంపూర్ణ ఇథనాల్ యొక్క సరైన వాల్యూమ్‌ను జోడించి, కిట్‌ను ఉపయోగించే ముందు బాగా కలపండి.
6. కణజాల నమూనా మోతాదు తగినది కాదు.
సిఫార్సు: 10-20 mg కణజాలం లేదా (1-5) × 10 ఉపయోగించండి6500 μl బఫర్ RL1కి కణాలు, అధిక కణజాల వినియోగం వలన RNA వెలికితీత తగ్గుతుంది.
7. సరికాని ఎలుషన్ వాల్యూమ్ లేదా అసంపూర్ణ ఎలుషన్.
సిఫార్సు: శుద్దీకరణ కాలమ్ యొక్క ఎలుషన్ వాల్యూమ్ 50-200 μl;ఎలుషన్ ప్రభావం సంతృప్తికరంగా లేకుంటే, ముందుగా వేడిచేసిన RNase-Free ddHని జోడించిన తర్వాత గది ఉష్ణోగ్రత ప్లేస్‌మెంట్ సమయాన్ని పొడిగించాలని సిఫార్సు చేయబడింది2O, ఉదా 5-10 నిమిషాలు.
8.బఫర్ RW2 వాష్ తర్వాత శుద్దీకరణ కాలమ్ ఇథనాల్ అవశేషాలను కలిగి ఉంటుంది.
సిఫార్సు: బఫర్ RW2 కడగడం, ఖాళీ ట్యూబ్ సెంట్రిఫ్యూగేషన్ 1నిమి తర్వాత ఇథనాల్ అవశేషాలు ఉంటే, ఖాళీ ట్యూబ్ సెంట్రిఫ్యూగేషన్ ఆపరేషన్ కోసం సమయాన్ని 2నిమిషాలకు పెంచవచ్చు లేదా అవశేష ఇథనాల్‌ను తగినంతగా తొలగించడానికి 5 నిమిషాల పాటు ప్యూరిఫికేషన్ కాలమ్‌ను గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద ఉంచవచ్చు.
శుద్ధి చేయబడిన RNA అధోకరణం చెందుతుంది
శుద్ధి చేయబడిన RNA యొక్క నాణ్యత నమూనా యొక్క సంరక్షణ, RNase కాలుష్యం మరియు మానిప్యులేషన్ మొదలైన అంశాలకు సంబంధించినది.
1. కణజాల నమూనాలు సమయానికి ఉంచబడవు.
సిఫార్సు: కణజాల నమూనాలు లేదా కణాలను సేకరించిన తర్వాత సకాలంలో ఉపయోగించకపోతే, వెంటనే -80 °C లేదా ద్రవ నత్రజని వద్ద క్రయోప్రెజర్వ్ చేయండి.RNAను సంగ్రహించడానికి, వీలైనప్పుడల్లా కొత్తగా తీసుకున్న కణజాలం లేదా సెల్ నమూనాను ఉపయోగించండి.
2. కణజాల నమూనాల పునరావృత ఫ్రీజ్-థావింగ్.
సిఫార్సు: కణజాల నమూనాలను నిల్వ చేసేటప్పుడు, వాటిని భద్రపరచడం కోసం చిన్న ముక్కలుగా కట్ చేయడం ఉత్తమం మరియు నమూనా యొక్క పదేపదే ఫ్రీజ్-థావింగ్ మరియు RNA క్షీణతను నివారించడానికి వాటిని ఉపయోగించినప్పుడు ముక్కలలో ఒకదాన్ని తీసివేయడం మంచిది.
3. ఆపరేషన్ సమయంలో RNase పరిచయం చేయబడింది లేదా పునర్వినియోగపరచలేని చేతి తొడుగులు, ముసుగులు మొదలైన వాటిని ధరించదు.
సిఫార్సు: RNA వెలికితీత ప్రయోగాలు ప్రత్యేక RNA మానిప్యులేషన్ గదులలో ఉత్తమంగా నిర్వహించబడతాయి మరియు ప్రయోగానికి ముందు పట్టిక క్లియర్ చేయబడుతుంది.
RNase పరిచయం వల్ల కలిగే RNA క్షీణతను తగ్గించడానికి ప్రయోగం సమయంలో డిస్పోజబుల్ గ్లోవ్స్ మరియు మాస్క్‌లను ధరించండి.
4. ఉపయోగం సమయంలో RNaseతో కారకాలు కలుషితమవుతాయి.
సిఫార్సు: సంబంధిత ప్రయోగాల కోసం కొత్త యానిమల్ టోటల్ RNA ఐసోలేషన్ కిట్‌తో భర్తీ చేయండి.
5. RNA మానిప్యులేషన్‌లో ఉపయోగించే సెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్‌లు, చిట్కాలు మొదలైనవి RNaseతో కలుషితమయ్యాయి.
సిఫార్సు: RNA వెలికితీతలో ఉపయోగించే సెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్‌లు, చిట్కాలు, పైపెట్‌లు మొదలైనవన్నీ RNase-ఫ్రీ అని నిర్ధారించండి.
శుద్ధి చేయబడిన RNA దిగువ ప్రయోగాలను ప్రభావితం చేస్తుంది
ప్యూరిఫికేషన్ కాలమ్ ద్వారా శుద్ధి చేయబడిన RNA, ఉప్పు అయాన్లు చాలా పెద్దగా ఉంటే, ప్రోటీన్ కంటెంట్ దిగువ ప్రయోగాన్ని ప్రభావితం చేస్తుంది, అవి: రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్, నార్తర్న్ బ్లాట్ మరియు ఇతరులు.
1. ఎలుషన్డ్ RNA ఉప్పు అయాన్ అవశేషాలను కలిగి ఉంటుంది.
సిఫార్సు: బఫర్ RW2కి సరైన ఇథనాల్ వాల్యూమ్ జోడించబడిందని నిర్ధారించండి మరియు ఆపరేషన్ కోసం సూచించిన సెంట్రిఫ్యూగల్ వేగంతో 2 ప్యూరిఫికేషన్ కాలమ్ వాష్‌లను చేయండి;ఏదైనా ఉప్పు అయాన్ అవశేషాలు ఉన్నట్లయితే, గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద 5 నిమిషాలు బఫర్ RW2కి శుద్ధీకరణ కాలమ్‌ను వదిలివేయండి మరియు ఉప్పు కాలుష్యాన్ని గరిష్టంగా తొలగించడానికి సెంట్రిఫ్యూగేషన్ చేయండి.
2. ఎల్యూషన్డ్ RNAలో ఇథనాల్ అవశేషాలు.
సిఫార్సు: బఫర్ RW2 కడగడం తర్వాత, ఆపరేషన్ కోసం సూచించిన సెంట్రిఫ్యూగేషన్ వేగంతో ఖాళీ ట్యూబ్ సెంట్రిఫ్యూగేషన్ ఆపరేషన్‌ను నిర్వహించాలని నిర్ధారించండి, ఇంకా ఇథనాల్ అవశేషాలు ఉంటే ఖాళీ ట్యూబ్ సెంట్రిఫ్యూగేషన్ ఆపరేషన్ సమయాన్ని 2 నిమిషాలకు పెంచండి లేదా గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద 5 నిమిషాల పాటు వదిలివేయండి.
