డైరెక్ట్ RT-qPCR కిట్ II
కిట్ వివరణ:
◮ప్రత్యేకమైన రియాక్షన్ బఫర్‌తో ఫోర్జీన్ అభివృద్ధి చేస్తున్న ఫోర్జీ రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్టేజ్ మరియు ఫోరేజీ హెచ్‌ఎస్ టాక్ DNA పాలిమరేస్‌ని ఉపయోగించి డైరెక్ట్ RT-qPCR కిట్, ఈ కిట్‌ను బలమైన ప్రతిఘటన మరియు అనుకూలతతో చేస్తుంది మరియు ఇది రియాక్షన్ వినియోగ ఫోర్జీన్ లైసిస్ సిస్టమ్‌ను టెంప్లేట్‌గా నేరుగా పరీక్షించగలదు.ఈ కిట్ COVID-19 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ డిటెక్షన్ కిట్ మరియు ఇతర వ్యాధికారక బ్యాక్టీరియా న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ డిటెక్షన్ కిట్ డెవలప్‌మెంట్ కోసం దరఖాస్తు చేసుకోవచ్చు.
వివరణ
డైరెక్ట్ RT-qPCR కిట్ విడిగా ప్యాక్ చేయబడిన RT-qPCR బఫర్‌ను అందిస్తుంది, అధిక సమర్థవంతమైన ఫోర్సీ HS టాక్ DNA పాలిమరేస్మరియు ఫోర్సీ రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్టేజ్ (MMLV),సాధారణ ధృవీకరణలో బ్యాక్-ఎండ్ కిట్‌లు మరియు సిస్టమ్ సర్దుబాటును రూపొందించడానికి ఇది సౌకర్యవంతంగా ఉంటుంది.
ప్రత్యేకమైన రియాక్షన్ బఫర్‌తో ఫోర్జీన్ అభివృద్ధి చేస్తున్న ఫోర్జీ రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్టేజ్ మరియు ఫోరేజీ హెచ్‌ఎస్ టాక్ DNA పాలిమరేస్‌ని ఉపయోగించి డైరెక్ట్ RT-qPCR కిట్, ఈ కిట్‌ను బలమైన ప్రతిఘటన మరియు అనుకూలతతో చేస్తుంది మరియు ఇది రియాక్షన్ వినియోగ ఫోర్జీన్ లైసిస్ సిస్టమ్‌ను టెంప్లేట్‌గా నేరుగా పరీక్షించగలదు.ఈ కిట్ COVID-19 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ డిటెక్షన్ కిట్ మరియు ఇతర వ్యాధికారక బ్యాక్టీరియా న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ డిటెక్షన్ కిట్ డెవలప్‌మెంట్ కోసం దరఖాస్తు చేసుకోవచ్చు.
ఈ కిట్ నేరుగా IVD ఉత్పత్తి యొక్క భాగం, సులభంగా మరియు వేగంగా ఉపయోగించబడుతుంది.ఇది మళ్లీ అభివృద్ధి చెందకుండా, సులభమైన ధృవీకరణ మాత్రమే అవసరం.
స్పెసిఫికేషన్లు
500T, 50,000T
కిట్ భాగాలు
| కిట్ కంటెంట్‌లు (20 μL ప్రతిచర్య వ్యవస్థ) | IM-05111-02 | IM-05112-02 |
| 500 టి | 50,000 T | |
| ముందస్తు ఆర్ఎవర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్టేజ్ (200 U/μL) | 50 μL× 1 | 1 మి.లీ× 5 |
| ఫోర్సీ HS టాక్ DNA పాలిమరేస్ (5 U/μL) | 100 μL× 1 | 1 మి.లీ×10 |
| 2× డైరెక్ట్ RT-qPCRబఫర్ | 1 మి.లీ × 5 | 500 mL × 1 |
| సూచన | 1 | 1 |
ఆపరేటింగ్ దశలు
జ: టెంప్లేట్ మరియు రియాజెంట్‌ని సిద్ధం చేయండి
1. సిద్ధం చేసిన RNA టెంప్లేట్ (RNA టెంప్లేట్‌ను సంగ్రహించడానికి మరియు శుద్ధి చేయడానికి ఫోర్జీన్ టోటల్ RNA ఐసోలేషన్ కిట్ సిరీస్ కిట్‌ను ఉపయోగించమని సిఫార్సు చేయబడింది) లేదా నమూనా క్రాకింగ్ ఉత్పత్తి (ఫోరేజీన్ లైసిస్ సిస్టమ్‌ను ఉపయోగించమని సిఫార్సు చేయబడింది), నిర్దిష్ట ప్రైమర్‌లు (10 μM) మరియు ఇతర సంబంధిత వినియోగ వస్తువులు, పరికరాన్ని సిద్ధం చేయండి.
2. 2× డైరెక్ట్ RT-qPCR బఫర్, RNase-Free ddH2O మరియు 20× ROX రెఫరెన్స్ డై (అవసరమైతే) మంచుతో కూడిన పెట్టెలో ఉంచండి, వీటిని సహజంగా కరిగిపోయేలా చేసి, సున్నితంగా కలపండి.
B: RT-qPCR వ్యవస్థను సిద్ధం చేయండి
ప్రతిచర్య వ్యవస్థ యొక్క ప్రతిచర్య బఫర్‌లో సగం వాల్యూమ్‌ను పొందండి (ఉదాహరణకు, సిస్టమ్ యొక్క వాల్యూమ్ 20 μL అయితే, అది 10 μL 2× డైరెక్ట్ RT-qPCR బఫర్‌ను పొందాలి). కోసంఎంజైమ్ యొక్క సంబంధిత మొత్తం, మేము సూచిస్తున్నాముM-MLV: 10-30 U/20 μL ప్రతిచర్య వ్యవస్థ,టాక్DNA పాలిమరేస్:1-2 U/20 μL ప్రతిచర్య వ్యవస్థఇది మా సూచన, మీరు దీన్ని పరీక్షించి సర్దుబాటు చేయాలి), RNA టెంప్లేట్, నిర్దిష్ట ప్రైమర్‌లు మరియు ప్రోబ్‌లను జోడించండి మరియు RNase-Free ddHని జోడించండి2O నుండి 20 μL.RT-qPCR ప్రతిచర్య వ్యవస్థ యొక్క నిర్దిష్ట తయారీని క్రింది పట్టిక 1కి సూచించవచ్చు.
టేబుల్ 1 : RT-qPCR వ్యవస్థను సిద్ధం చేయండి
| భాగం | వాల్యూమ్ | చివరి ఏకాగ్రత |
| 2× డైరెక్ట్ RT-qPCR బఫర్ | 10 μL | 1× |
| ఫోర్సీ రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్టేజ్ (MMLV) | 10-30 U | |
| ఫోర్సీ HS టాక్ DNA పాలిమరేస్ | 1-2 U | |
| ఫార్వర్డ్ ప్రైమర్ (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| రివర్స్ ప్రైమర్ (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| ప్రోబ్(4 μM) | 1 μL | 200nM |
| మూస(RNA లేదా లైసేట్) | X μL | |
| 20× ROX రిఫరెన్స్ డై | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| మొత్తం వాల్యూమ్ | 20 μL |
గమనిక: ఫార్వర్డ్ ప్రైమర్ మరియు రివర్స్ ప్రైమర్ లక్ష్య జన్యువు యొక్క నిర్దిష్ట ప్రైమర్‌లు.qPCR వ్యవస్థను ఆచరణాత్మక ప్రయోగాత్మక మరియు PCR నమూనాల ప్రకారం సర్దుబాటు చేయవచ్చు.చాలా ప్రైమర్‌ల తుది ఏకాగ్రత కోసం మేము 400nMని సిఫార్సు చేస్తున్నాము.దయచేసి సిద్ధం చేసిన ఏకాగ్రత మరియు సిఫార్సు చేయబడిన తుది ఏకాగ్రత ప్రకారం నిర్దిష్ట ప్రైమర్‌లు మరియు ప్రోబ్‌ల వాల్యూమ్‌ను సర్దుబాటు చేయండి.
1*: వివిధ పరిమాణాత్మక PCR సాధనాల ప్రకారం ROX రిఫరెన్స్ డై యొక్క సరైన తుది సాంద్రతను ఎంచుకోండి.సాధారణ పరిమాణాత్మక PCR సాధనాల యొక్క సరైన ROX రిఫరెన్స్ డై ఏకాగ్రత క్రింది పట్టికలో చూపబడింది:
| పరిమాణాత్మక PCR సాధనాలు | ROX రిఫరెన్స్ డై యొక్క చివరి ఏకాగ్రత |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/స్టెప్ వన్,మొదలైనవి | 1× (ఉదాహరణకు, 20 μL రియాక్షన్ సిస్టమ్‌లో 1μl 20×ROX రిఫరెన్స్ డైని జోడించండి) |
| ABI 7500, 7500 ఫాస్ట్, స్ట్రాటజీన్ Mx3000P, Mx3005P మరియు Mx4000, మొదలైనవి. | 0.5× (ఉదాహరణకు, 20 μL రియాక్షన్ సిస్టమ్‌లో 0.5μl 20×ROX రిఫరెన్స్ డైని జోడించండి) |
| రోచె PCR పరికరం, బయో-రాడ్ PCR పరికరం, Eppendorf క్వాంటిటేటివ్ PCR పరికరం మొదలైనవి. | ROX రిఫరెన్స్ డై లేకుండా |
నిల్వ మరియు షెల్ఫ్ జీవితం
కిట్ -20 ± 5℃ వద్ద నిల్వ చేయాలి.ఇది వెంటనే -20 ℃ థర్మోస్టాటిక్ రిఫ్రిజిరేటర్‌లో నిల్వ చేయాలి.సరైన స్థితిలో నిల్వ చేయబడితే చెల్లుబాటు వ్యవధి 2 సంవత్సరాలు.
