శుద్ధి చేయని నమూనా రియల్-టైమ్ క్వాంటిటేటివ్ PCR డైరెక్ట్ మల్టీప్లెక్స్ ప్రోబ్ Qpcr మిక్స్ ప్లస్ U కోసం 2× కేంద్రీకృత ప్రీమిక్స్ కోసం చైనా తయారీదారు
సంస్థ "శాస్త్రీయ నిర్వహణ, అధిక నాణ్యత మరియు సమర్థత ప్రైమసీ, చైనా తయారీదారు కోసం కొనుగోలుదారు సుప్రీం 2× అన్ప్యూరిఫైడ్ శాంపిల్ రియల్ టైమ్ క్వాంటిటేటివ్ PCR డైరెక్ట్ మల్టీప్లెక్స్ ప్రోబ్ Qpcr మిక్స్ ప్లస్ U కోసం చైనా తయారీదారు కోసం సర్వోన్నతమైన ప్రొసీజర్ కాన్సెప్ట్ను కొనసాగిస్తుంది. మా వ్యాపారం ప్రతిష్ఠాత్మకమైన మరియు సురక్షితమైన కస్టమర్లకు ప్రతిష్టాత్మకమైన మరియు సురక్షితమైన ఉత్పత్తులను అందించడానికి అంకితం చేయబడింది.
సంస్థ "శాస్త్రీయ నిర్వహణ, అధిక నాణ్యత మరియు సమర్థత ప్రాధాన్యత, కొనుగోలుదారు సుప్రీం" అనే ప్రక్రియ భావనను కొనసాగిస్తుంది.చైనా టాక్ DNA పాలిమరేస్ మరియు Qpcr, మా కంపెనీ సమృద్ధిగా బలాన్ని కలిగి ఉంది మరియు స్థిరమైన మరియు ఖచ్చితమైన విక్రయాల నెట్వర్క్ వ్యవస్థను కలిగి ఉంది.పరస్పర ప్రయోజనాల ఆధారంగా స్వదేశంలో మరియు విదేశాల్లోని కస్టమర్లందరితో మంచి వ్యాపార సంబంధాలను ఏర్పరచుకోవాలని మేము కోరుకుంటున్నాము.
రియల్ టైమ్ PCR ప్రైమర్ డిజైన్ సూత్రాలు
ఫార్వర్డ్ ప్రైమర్ మరియు రివర్స్ ప్రైమర్
రియల్ టైమ్ PCR కోసం, ప్రైమర్ డిజైన్ చాలా ముఖ్యం.ప్రైమర్లు PCR యాంప్లిఫికేషన్ యొక్క విశిష్టత మరియు సామర్థ్యానికి సంబంధించినవి మరియు క్రింది సూత్రాలకు సంబంధించి రూపొందించబడతాయి:
- ప్రైమర్ పొడవు: 18-30bp.
- GC కంటెంట్: 40-60%.
- Tm విలువ: ప్రైమర్ 5 వంటి ప్రైమర్ డిజైన్ సాఫ్ట్వేర్, ప్రైమర్ యొక్క Tm విలువను ఇవ్వగలదు.అప్స్ట్రీమ్ మరియు డౌన్స్ట్రీమ్ ప్రైమర్ల Tm విలువలు వీలైనంత దగ్గరగా ఉండాలి.Tm గణన సూత్రాన్ని కూడా ఉపయోగించవచ్చు: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR చేస్తున్నప్పుడు, ప్రైమర్ Tm విలువ 5 °C కంటే తక్కువ ఉష్ణోగ్రత సాధారణంగా ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రతగా ఎంపిక చేయబడుతుంది (ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రతలో సంబంధిత పెరుగుదల PCR ప్రతిచర్య యొక్క నిర్దిష్టతను పెంచుతుంది).
- ప్రైమర్లు మరియు PCR ఉత్పత్తులు:
- డిజైన్ ప్రైమర్ PCR యాంప్లిఫికేషన్ ఉత్పత్తి పొడవు ప్రాధాన్యంగా 100-150bp.
- టెంప్లేట్ యొక్క సెకండరీ స్ట్రక్చరల్ ఏరియాలో డిజైన్ ప్రైమర్లను వీలైనంత వరకు నివారించాలి.
- అప్స్ట్రీమ్ మరియు డౌన్స్ట్రీమ్ ప్రైమర్ల 3′ చివరల మధ్య 2 లేదా అంతకంటే ఎక్కువ కాంప్లిమెంటరీ బేస్ల ఏర్పాటును నివారించండి.
- ప్రైమర్ 3′ టెర్మినల్ బేస్ 3 అదనపు వరుస G లేదా Cతో ఉండకూడదు.
- ప్రైమర్లు తాము పరిపూరకరమైన నిర్మాణాలను కలిగి ఉండవు, లేకుంటే ఒక హెయిర్పిన్ నిర్మాణం ఏర్పడుతుంది, ఇది PCR విస్తరణను ప్రభావితం చేస్తుంది.
- ATCGని ప్రైమర్ సీక్వెన్స్లో వీలైనంత సమానంగా పంపిణీ చేయాలి మరియు 3′ టెర్మినల్ బేస్ను T వలె నివారించాలి.
అపెండిక్స్1: సిఅన్ని డైరెక్ట్RT-qPCR కిట్ కంపోనెన్t సప్లిమెంట్ ప్యాక్
1.సెల్ లిసిస్ సొల్యూషన్
సెల్ లిసిస్ సొల్యూషన్ | |||
కిట్ భాగాలు (24-బావి లైసిస్ సిస్టమ్ / బావి) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 టి | 500 టి | ||
భాగంI | బఫర్ CL | 20 మి.లీ | 100 మి.లీ |
ఫోర్జీన్ ప్రోటీజ్ ప్లస్ II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
బఫర్ ST | 1 ml × 2 | 10 మి.లీ | |
భాగంII | DNA ఎరేజర్ | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT మిక్స్ | |
కిట్ భాగాలు (20 μl ప్రతిచర్య వ్యవస్థ) | DRT-01011-B1 |
200 టి | |
5× డైరెక్ట్ RT మిక్స్ | 800 μl |
RNase-ఉచిత ddH2O | 1.7 ml × 2 |
qPCR మిక్స్ | ||
కిట్ భాగాలు (20 μl ప్రతిచర్య వ్యవస్థ) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 టి | 1000 టి | |
2× డైరెక్ట్ qPCR మిక్స్-తక్మాన్ | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
20× ROX రిఫరెన్స్ డై | 40 μl | 200 μl |
RNase-ఉచిత ddH2O | 1.7 మి.లీ | 10 మి.లీ |
సంస్థ "శాస్త్రీయ నిర్వహణ, అధిక నాణ్యత మరియు సమర్థత ప్రైమసీ, చైనా తయారీదారు కోసం కొనుగోలుదారు సుప్రీం 2× అన్ప్యూరిఫైడ్ శాంపిల్ రియల్ టైమ్ క్వాంటిటేటివ్ PCR డైరెక్ట్ మల్టీప్లెక్స్ ప్రోబ్ Qpcr మిక్స్ ప్లస్ U కోసం చైనా తయారీదారు కోసం సర్వోన్నతమైన ప్రొసీజర్ కాన్సెప్ట్ను కొనసాగిస్తుంది. మా వ్యాపారం ప్రతిష్ఠాత్మకమైన మరియు సురక్షితమైన కస్టమర్లకు ప్రతిష్టాత్మకమైన మరియు సురక్షితమైన ఉత్పత్తులను అందించడానికి అంకితం చేయబడింది.
కోసం చైనా తయారీదారుచైనా టాక్ DNA పాలిమరేస్ మరియు Qpcr, మా కంపెనీ సమృద్ధిగా బలాన్ని కలిగి ఉంది మరియు స్థిరమైన మరియు ఖచ్చితమైన విక్రయాల నెట్వర్క్ వ్యవస్థను కలిగి ఉంది.పరస్పర ప్రయోజనాల ఆధారంగా స్వదేశంలో మరియు విదేశాల్లోని కస్టమర్లందరితో మంచి వ్యాపార సంబంధాలను ఏర్పరచుకోవాలని మేము కోరుకుంటున్నాము.
రియల్ టైమ్ PCR ప్రైమర్ డిజైన్ సూత్రాలు
ఫార్వర్డ్ ప్రైమర్ మరియు రివర్స్ ప్రైమర్
రియల్ టైమ్ PCR కోసం, ప్రైమర్ డిజైన్ చాలా ముఖ్యం.ప్రైమర్లు PCR యాంప్లిఫికేషన్ యొక్క విశిష్టత మరియు సామర్థ్యానికి సంబంధించినవి మరియు క్రింది సూత్రాలకు సంబంధించి రూపొందించబడతాయి:
- ప్రైమర్ పొడవు: 18-30bp.
- GC కంటెంట్: 40-60%.
- Tm విలువ: ప్రైమర్ 5 వంటి ప్రైమర్ డిజైన్ సాఫ్ట్వేర్, ప్రైమర్ యొక్క Tm విలువను ఇవ్వగలదు.అప్స్ట్రీమ్ మరియు డౌన్స్ట్రీమ్ ప్రైమర్ల Tm విలువలు వీలైనంత దగ్గరగా ఉండాలి.Tm గణన సూత్రాన్ని కూడా ఉపయోగించవచ్చు: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR చేస్తున్నప్పుడు, ప్రైమర్ Tm విలువ 5 °C కంటే తక్కువ ఉష్ణోగ్రత సాధారణంగా ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రతగా ఎంపిక చేయబడుతుంది (ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రతలో సంబంధిత పెరుగుదల PCR ప్రతిచర్య యొక్క నిర్దిష్టతను పెంచుతుంది).
- ప్రైమర్లు మరియు PCR ఉత్పత్తులు:
- డిజైన్ ప్రైమర్ PCR యాంప్లిఫికేషన్ ఉత్పత్తి పొడవు ప్రాధాన్యంగా 100-150bp.
- టెంప్లేట్ యొక్క సెకండరీ స్ట్రక్చరల్ ఏరియాలో డిజైన్ ప్రైమర్లను వీలైనంత వరకు నివారించాలి.
- అప్స్ట్రీమ్ మరియు డౌన్స్ట్రీమ్ ప్రైమర్ల 3′ చివరల మధ్య 2 లేదా అంతకంటే ఎక్కువ కాంప్లిమెంటరీ బేస్ల ఏర్పాటును నివారించండి.
- ప్రైమర్ 3′ టెర్మినల్ బేస్ 3 అదనపు వరుస G లేదా Cతో ఉండకూడదు.
- ప్రైమర్లు తాము పరిపూరకరమైన నిర్మాణాలను కలిగి ఉండవు, లేకుంటే ఒక హెయిర్పిన్ నిర్మాణం ఏర్పడుతుంది, ఇది PCR విస్తరణను ప్రభావితం చేస్తుంది.
- ATCGని ప్రైమర్ సీక్వెన్స్లో వీలైనంత సమానంగా పంపిణీ చేయాలి మరియు 3′ టెర్మినల్ బేస్ను T వలె నివారించాలి.
అపెండిక్స్1: సిఅన్ని డైరెక్ట్RT-qPCR కిట్ కంపోనెన్t సప్లిమెంట్ ప్యాక్
1.సెల్ లిసిస్ సొల్యూషన్
సెల్ లిసిస్ సొల్యూషన్ | |||
కిట్ భాగాలు (24-బావి లైసిస్ సిస్టమ్ / బావి) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 టి | 500 టి | ||
భాగంI | బఫర్ CL | 20 మి.లీ | 100 మి.లీ |
ఫోర్జీన్ ప్రోటీజ్ ప్లస్ II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
బఫర్ ST | 1 ml × 2 | 10 మి.లీ | |
భాగంII | DNA ఎరేజర్ | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT మిక్స్ | |
కిట్ భాగాలు (20 μl ప్రతిచర్య వ్యవస్థ) | DRT-01011-B1 |
200 టి | |
5× డైరెక్ట్ RT మిక్స్ | 800 μl |
RNase-ఉచిత ddH2O | 1.7 ml × 2 |
qPCR మిక్స్ | ||
కిట్ భాగాలు (20 μl ప్రతిచర్య వ్యవస్థ) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 టి | 1000 టి | |
2× డైరెక్ట్ qPCR మిక్స్-తక్మాన్ | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
20× ROX రిఫరెన్స్ డై | 40 μl | 200 μl |
RNase-ఉచిత ddH2O | 1.7 మి.లీ | 10 మి.లీ |
ఇన్స్ట్రక్షన్ మాన్యువల్లు: