A260/A230 యొక్క తక్కువ నిష్పత్తి సాధారణంగా 230nm వద్ద గరిష్ట శోషణ తరంగదైర్ఘ్యంతో మలినాలను కలిగి ఉంటుంది.ఈ మలినాలు ఏమిటో చూద్దాం:

• సాధారణ కాలుష్య కారకాలు	శోషణ తరంగదైర్ఘ్యం	నిష్పత్తి ప్రభావం
  ప్రొటీన్	~230nm మరియు 280nm	A యొక్క ఏకకాల తగ్గింపు260/A 280మరియు ఎ260/A 280నిష్పత్తులు
  గ్వానిడిన్ ఉప్పు	220-240 nm	A ని తగ్గించండి260/A 280నిష్పత్తి
  ఫినాల్	~270nm	-
  ట్రైజోల్	~230nm మరియు 270nm	A ని తగ్గించండి260/A 280నిష్పత్తి
  EDTA	~230nm	A ని తగ్గించండి260/A 280నిష్పత్తి
  ఇథనాల్	230-240 nm	A ని తగ్గించండి260/A 280నిష్పత్తి

 
 
 
సాధారణ కాలుష్య కారకాల యొక్క శోషణ తరంగదైర్ఘ్యం మరియు వ్యత్యాస విలువ

Pరోటీన్ కాలుష్యం
న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ వెలికితీత ప్రక్రియలో ప్రోటీన్ కాలుష్యం అత్యంత సాధారణ కాలుష్యంగా పరిగణించబడుతుంది.ఎగువ సజల దశ మరియు దిగువ మధ్య ప్రోటీన్ ఉంటుందిసేంద్రీయదశ .కాలుష్యం ఒకే సమయంలో A260/A280 మరియు A260/A230 నిష్పత్తిని తగ్గిస్తుంది మరియు A260/A230 నిష్పత్తి A260/A280 నిష్పత్తి కంటే స్పష్టంగా మారుతుంది.
తదుపరి సమయంలోరివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్షన్or qPCR ప్రతిచర్యలు, ప్రోటీన్ అవశేషాలు ఎంజైమ్ పనితీరును నిరోధిస్తాయి లేదా అంతరాయం కలిగిస్తాయి.ప్రోటీన్ కలుషితాన్ని నివారించడానికి ఉత్తమ మార్గం ఏమిటంటే, సూపర్‌నాటెంట్‌ను ఆశించేటప్పుడు "ఎక్కువ కంటే తక్కువ, చాలా సార్లు తక్కువ మొత్తం" అనే సూత్రాన్ని గుర్తుంచుకోవడం.

2. గ్వానిడినియం కాలుష్యం
హైడ్రోక్లోరైడ్ (GuHCl) మరియు గ్వానిడైన్ థియోసైనేట్ (GTC) ప్రొటీన్‌లను డీనాటరింగ్ చేసే ప్రభావాన్ని కలిగి ఉంటాయి, ఇవి న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ వెలికితీత ప్రక్రియలో కణ త్వచాలను త్వరగా నాశనం చేయగలవు, దీనివల్ల ప్రోటీన్ డీనాటరేషన్ మరియు అవపాతం ఏర్పడతాయి.GuHCl మరియు GTC యొక్క శోషణ తరంగదైర్ఘ్యం 220-240 nm మధ్య ఉంటుంది మరియుఅవశేష గ్వానిడినియం ఉప్పు A260/A230 నిష్పత్తిని తగ్గిస్తుంది.అవశేష గ్వానిడినియం ఉప్పు నిష్పత్తిని తగ్గిస్తుంది,దిగువ ప్రయోగాలపై ప్రభావం నిజానికి చాలా తక్కువ.

3. ట్రైజోల్ కాలుష్యం
ట్రైజోల్ యొక్క ప్రధాన భాగం ఫినాల్.ఫినాల్ యొక్క ప్రధాన విధి కణాలను లైస్ చేయడం మరియు కణాలలో ప్రోటీన్లు మరియు న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పదార్థాలను విడుదల చేయడం.ఫినాల్ ప్రొటీన్లను సమర్థవంతంగా తగ్గించగలిగినప్పటికీ, ఇది RNase కార్యాచరణను పూర్తిగా నిరోధించదు.అందువల్ల, 8-హైడ్రాక్సీక్వినోలిన్, గ్వానిడైన్ ఐసోథియోసైనేట్, β-మెర్కాప్టోఇథనాల్ మొదలైనవి TRIzolకు ఎండోజెనస్ మరియు ఎక్సోజనస్ RNaseని నిరోధించడానికి జోడించబడతాయి.
సెల్యులార్ RNAను సంగ్రహిస్తున్నప్పుడు, ట్రైజోల్ కణాలను వేగంగా లైస్ చేస్తుంది మరియు కణాల నుండి విడుదలయ్యే న్యూక్లీజ్‌ను నిరోధిస్తుంది మరియు అవశేష ట్రైజోల్ A260/A230 నిష్పత్తిని గణనీయంగా తగ్గిస్తుంది.
ప్రాసెసింగ్ పద్ధతి: సెంట్రిఫ్యూజింగ్ చేసినప్పుడు, ట్రైజోల్‌లోని ఫినాల్ 4° మరియు గది ఉష్ణోగ్రతలో నీటి దశలో సులభంగా కరుగుతుందని గమనించాలి.

4. ఇథనాల్ అవశేషాలు
DNAకి కట్టుబడి ఉండే ఉప్పు అయాన్‌లను కరిగించేటప్పుడు DNA అవక్షేపించడానికి ఇథనాల్ చివరి ప్రక్రియలో ఉపయోగించబడుతుంది.అత్యధిక శోషణ తరంగదైర్ఘ్యంయొక్క శోషణ శిఖరంఇథనాల్ 230-240 nm వద్ద కూడా ఉంటుందిA260/A230 నిష్పత్తిని కూడా తగ్గిస్తుంది.
ఇథనాల్ అవశేషాలను నివారించే పద్ధతిని చివరి ఎలుషన్ సమయంలో రెండుసార్లు పునరావృతం చేయవచ్చు.ఫ్యూమ్ హుడ్ఎల్యూషన్ కోసం బఫర్‌ను జోడించే ముందు ఇథనాల్ పూర్తిగా ఆవిరైపోయేలా చేయడానికి రెండు నిమిషాలు.
అయినప్పటికీ, నిష్పత్తి RNA నాణ్యత యొక్క మూల్యాంకన సూచిక మాత్రమే అని తెలుసుకోవాలి.పైన పేర్కొన్న కార్యకలాపాలు ఖచ్చితంగా నియంత్రించబడితే, నిష్పత్తి మరియు ప్రామాణిక పరిధి మధ్య విచలనం దిగువ ప్రయోగాలపై గొప్ప ప్రభావాన్ని చూపదు.
సంబంధిత ఉత్పత్తులు:
యానిమల్ టోటల్ RNA ఐసోలేషన్ కిట్
మొక్క మొత్తం RNA ఐసోలేషన్ కిట్
సెల్ మొత్తం RNA ఐసోలేషన్ కిట్
ప్లాంట్ టోటల్ RNA ఐసోలేషన్ కిట్ ప్లస్