ప్రయోగ సిబ్బంది ప్రవర్తనను ప్రామాణీకరించడానికి PCR ప్రయోగం SOPని ఏర్పాటు చేయండి.
ప్రయోగాత్మకుడు ఆపరేటింగ్ విధానాలకు ఖచ్చితంగా కట్టుబడి ఉంటాడు మరియు మానవ కారకాల వల్ల సంభవించే లేదా కాలుష్యం సంభవించకుండా నిరోధించే PCR కాలుష్యాన్ని తగ్గిస్తుంది.అదనంగా, ప్రయోగికుడు సంబంధిత పరికరాలను నిర్వహించడంలో నైపుణ్యం, మొత్తం పని ప్రక్రియను స్పష్టం చేయడం, కాలుష్యం యొక్క చికిత్సా పద్ధతులు మరియు ప్రయోగశాల నాణ్యత నియంత్రణ పద్ధతులపై పట్టు సాధించడం మరియు పరీక్ష ఫలితాలను సరిగ్గా అర్థం చేసుకోగల సామర్థ్యంతో పాటు సంబంధిత వృత్తిపరమైన జ్ఞానం మరియు నైపుణ్యాలను కలిగి ఉండాలి.
ప్రామాణిక PCR ప్రయోగశాలను ఏర్పాటు చేయండి.
PCR ప్రయోగశాల సూత్రప్రాయంగా నాలుగు ప్రాంతాలుగా విభజించబడింది, అవి రియాజెంట్ తయారీ ప్రాంతం, నమూనా ప్రాసెసింగ్ ప్రాంతం, యాంప్లిఫికేషన్ ప్రాంతం మరియు యాంప్లిఫికేషన్ ఉత్పత్తి విశ్లేషణ ప్రాంతం.మొదటి రెండు ప్రాంతాలు ప్రీ-యాంప్లిఫికేషన్ ప్రాంతాలు మరియు చివరి రెండు ప్రాంతాలు పోస్ట్-యాంప్లిఫికేషన్ ప్రాంతాలు.ప్రీ-యాంప్లిఫికేషన్ జోన్ మరియు పోస్ట్-యాంప్లిఫికేషన్ జోన్ ఖచ్చితంగా వేరు చేయబడాలి.ప్రయోగాత్మక పదార్థాలు, రియాజెంట్‌లు, రికార్డింగ్ పేపర్, పెన్నులు, శుభ్రపరిచే పదార్థాలు మొదలైనవి, ప్రీ-యాంప్లిఫికేషన్ ఏరియా నుండి పోస్ట్-యాంప్లిఫికేషన్ ఏరియాకి మాత్రమే ప్రవహించగలవు, అంటే రియాజెంట్ తయారీ ప్రాంతం → నమూనా ప్రాసెసింగ్ ప్రాంతం → యాంప్లిఫికేషన్ ఏరియా → యాంప్లిఫికేషన్ ఉత్పత్తి విశ్లేషణ ప్రాంతం మరియు వెనుకకు ప్రవహించకూడదు .ప్రయోగశాలలోని వాయుప్రవాహం కూడా ప్రీ-యాంప్లిఫికేషన్ ప్రాంతం నుండి పోస్ట్-యాంప్లిఫికేషన్ ప్రాంతానికి ప్రవహించాలి మరియు వెనుకకు ప్రవహించకూడదు.ఆదర్శ PCR ప్రయోగశాల రూపకల్పన క్రింద చూపబడింది:
మూర్తి A: బఫర్ గదిలో ప్రతికూల ఒత్తిడితో ఆదర్శ PCR ప్రయోగశాల సెటప్ మోడ్
మూర్తి B: బఫర్ గదిలో సానుకూల ఒత్తిడితో ఆదర్శ PCR ప్రయోగశాల సెటప్ మోడ్
Figure A మరియు Figure Bలో ఇవ్వబడిన PCR ప్రయోగశాల సెటప్ రేఖాచిత్రాలు మరింత ఆదర్శవంతమైన సెటప్ మోడ్‌గా ఉండాలి మరియు షరతులతో కూడిన ప్రయోగశాల డిజైన్ కోసం ఈ మోడ్‌ను సూచించవచ్చు.సాధారణ ప్రయోగశాలల కోసం, PCR యాంప్లిఫికేషన్ ప్రాంతం మరియు ఉత్పత్తి విశ్లేషణ ప్రాంతాన్ని వేరు చేయాలని సిఫార్సు చేయబడింది మరియు నమూనా తయారీ ప్రాంతం మరియు PCR యాంప్లిఫికేషన్ ప్రాంతంలో కవర్ తెరవడాన్ని వీలైనంత తగ్గించాలి.గుర్తుంచుకోండి: ఉత్పత్తి విశ్లేషణ ప్రాంతంలోని ఉత్పత్తులు మరియు ప్రయోగాత్మక సామాగ్రిని నమూనా తయారీ ప్రాంతం మరియు PCR యాంప్లిఫికేషన్ ప్రాంతానికి తీసుకెళ్లడం ఖచ్చితంగా నిషేధించబడింది.
ప్రయోగశాల PCR గుర్తింపు మరియు గుర్తింపును మాత్రమే చేస్తే, సంప్రదాయ PCRకి బదులుగా ఫ్లోరోసెంట్ పరిమాణాత్మక PCRని ఉపయోగించమని సిఫార్సు చేయబడింది.
ఫ్లోరోసెన్స్ క్వాంటిటేటివ్ PCR డిటెక్షన్ ఫలితాలను ఫ్లోరోసెన్స్ సిగ్నల్స్ ద్వారా సేకరించి విశ్లేషించవచ్చు, కాబట్టి ప్రతిచర్య తర్వాత ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ కోసం మూత తెరవాల్సిన అవసరం లేదు, ఇది ఏరోసోల్‌లను రూపొందించడానికి ప్రతిచర్య ఉత్పత్తుల లీకేజీ వల్ల కలిగే PCR ఉత్పత్తి కాలుష్యాన్ని నివారిస్తుంది.మీరు జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ యొక్క లోడింగ్ దశలో క్యాప్ ఓపెనింగ్‌ల సంఖ్యను పెంచినట్లయితే, ఏరోసోల్ కాలుష్యం సంభవించే అవకాశం ఉంది.పరిమాణాత్మక PCR యొక్క అనువర్తనాన్ని ప్రోత్సహించాలని మరియు గుణాత్మక PCRని క్రమంగా భర్తీ చేయాలని సిఫార్సు చేయబడింది.
PCR ప్రతిచర్య కోసం UNG యాంటీ-పిసిఆర్ ఉత్పత్తి కాలుష్య వ్యవస్థ ఉపయోగించబడుతుంది.
సిస్టమ్ dTTPకి బదులుగా dUTPని ఉపయోగిస్తుంది.PCR ప్రతిచర్య తర్వాత, అన్ని PCR ఉత్పత్తులు (DNA శకలాలు) dUTPతో విలీనం చేయబడ్డాయి;PCR ప్రతిచర్య యొక్క తదుపరి రౌండ్‌లో, సిస్టమ్‌కు జోడించబడిన UNG ఎంజైమ్ PCR కంటే 5 నిమిషాల ముందు 37°C వద్ద పొదిగేది, ఇది ప్రత్యేకంగా dUTPని కలిగి ఉన్న అన్ని DNA శకలాలను క్షీణింపజేస్తుంది మరియు PCR ప్రతిచర్యను నిర్వహిస్తుంది.ఇది PCR ఉత్పత్తుల వల్ల కలిగే ఏరోసోల్ కాలుష్యాన్ని పూర్తిగా తొలగించగలదు.ప్రభావం క్రింది చిత్రంలో చూపబడింది:
గమనిక: డైరెక్ట్ PCR సిరీస్ కోసం, మీరు Foregene యొక్క యాంటీ PCR ఉత్పత్తి కాలుష్య వ్యవస్థ యొక్క సిరీస్ ఉత్పత్తులను ఎంచుకోవచ్చుసూచించండి
పెద్ద-స్థాయి జన్యురూప పరీక్షను నిర్వహించే ప్రయోగశాలల కోసం, సహేతుకమైన ప్రయోగశాలల నిర్మాణంతో పాటు రియాజెంట్‌లను పరీక్షించడానికి UNG యాంటీ-పిసిఆర్ ఉత్పత్తి కాలుష్య వ్యవస్థను ఉపయోగించాలని గట్టిగా సిఫార్సు చేయబడింది.
రిమైండర్: ఈ సిస్టమ్‌ని ఉపయోగించడం వలన ఇప్పటికే సంభవించిన PCR ఉత్పత్తి కాలుష్యాన్ని తీసివేయలేరు.అందువల్ల, సంబంధిత పరీక్ష ప్రారంభంలో UNG వ్యవస్థను ఉపయోగించాలి మరియు PCR ఉత్పత్తుల యొక్క ఫాల్స్ పాజిటివ్‌ను కలుషితం చేయకుండా నిరోధించడానికి, PCR విస్తరణ కోసం UNG వ్యవస్థను ఉపయోగించాలి.
పెద్ద-స్థాయి పరీక్షలను నిర్వహించేటప్పుడు ఫోర్జీన్ యొక్క డైరెక్ట్ PCR-UNG వ్యవస్థను ఉపయోగించమని సిఫార్సు చేయబడింది, అవి:
ప్లాంట్ లీఫ్ డైరెక్ట్ PCR కిట్-UNG
ప్లాంట్ సీడ్ డైరెక్ట్ PCR కిట్-UNG
యానిమల్ టిష్యూ డైరెక్ట్ PCR కిట్-UNG
మౌస్ టెయిల్ డైరెక్ట్ PCR కిట్-UNG;
జీబ్రా ఫిష్ డైరెక్ట్ PCR కిట్-UNG.
Foregene నుండి ఈ కిట్‌ల శ్రేణిPCR గుర్తింపును త్వరగా మరియు పెద్ద స్థాయిలో నిర్వహించడమే కాకుండా, PCR ఉత్పత్తి కాలుష్యాన్ని సమర్థవంతంగా నిరోధించవచ్చు మరియు నియంత్రించవచ్చు.
పోస్ట్ సమయం: మార్చి-19-2021
