PCR ప్రతిచర్య యొక్క అత్యుత్తమ లక్షణం దాని పెద్ద విస్తరణ సామర్థ్యం మరియు చాలా ఎక్కువ సున్నితత్వం.PCR పనితీరు మరియు గుర్తింపు సామర్థ్యాన్ని మెరుగుపరచడానికి, మేము PCR యాంప్లిఫికేషన్ కెపాసిటీ మరియు డిటెక్షన్ సెన్సిటివిటీని మెరుగుపరచడానికి కట్టుబడి ఉన్నాము, అయితే తలనొప్పి ప్రయోగం ప్రక్రియలో ఉంది.తప్పుడు పాజిటివ్‌లు తరచుగా జరుగుతాయి మరియు చాలా తక్కువ మొత్తంలో నమూనా క్రాస్-కాలుష్యం లేదా PCR ఉత్పత్తి కాలుష్యం ప్రయోగంలో తప్పుడు పాజిటివ్‌లకు కారణం కావచ్చు.
ఐదు రకాల PCR ఉత్పత్తి కాలుష్యం
PCR కాలుష్యానికి అనేక కారణాలు ఉన్నాయి, వీటిని సుమారుగా క్రింది వర్గాలుగా విభజించవచ్చు:
నమూనా కలుషితం ప్రధానంగా నమూనాను సేకరించడం కోసం కంటైనర్ యొక్క కాలుష్యం వలన సంభవిస్తుంది, లేదా నమూనాను ఉంచినప్పుడు, అది వదులుగా ఉన్న సీలింగ్ కారణంగా కంటైనర్ నుండి లీక్ అవుతుంది, లేదా నమూనా కంటైనర్ వెలుపలికి కట్టుబడి ఉంటుంది, ఇది క్రాస్-కాలుష్యానికి కారణమవుతుంది;కాలుష్యం నమూనాల మధ్య కలుషితానికి దారితీస్తుంది;కొన్ని సూక్ష్మజీవుల నమూనాలు, ముఖ్యంగా వైరస్‌లు, ఏరోసోల్‌లతో వ్యాప్తి చెందుతాయి లేదా ఏరోసోల్‌లను ఏర్పరుస్తాయి, ఫలితంగా పరస్పర కాలుష్యం ఏర్పడుతుంది.
ప్రధాన కారణం PCR కారకాల తయారీ సమయంలో, నమూనా తుపాకీ, కంటైనర్, డబుల్ డిస్టిల్డ్ వాటర్ మరియు ఇతర పరిష్కారాలు PCR న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ టెంప్లేట్ ద్వారా కలుషితమవుతాయి.
క్లోన్ చేయబడిన ప్లాస్మిడ్‌లను సానుకూల నియంత్రణలుగా ఉపయోగించే పరమాణు జీవశాస్త్ర ప్రయోగశాలలు మరియు కొన్ని ప్రయోగశాలలలో, క్లోన్ చేయబడిన ప్లాస్మిడ్ కాలుష్యం సమస్య కూడా సాధారణం.యూనిట్ వాల్యూమ్‌లో ప్లాస్మిడ్ క్లోనింగ్ కంటెంట్ చాలా ఎక్కువగా ఉంటుంది మరియు శుద్ధీకరణ ప్రక్రియలో మరిన్ని సాధనాలు మరియు కారకాలు అవసరమవుతాయి మరియు జీవ కణాల యొక్క బలమైన పెరుగుదల మరియు పునరుత్పత్తి సామర్థ్యం కారణంగా జీవ కణాలలోని ప్లాస్మిడ్ కలుషితమయ్యే అవకాశం ఉంది.
PCR ప్రతిచర్యలలో విస్తరించిన ఉత్పత్తుల కాలుష్యం అత్యంత సాధారణ కాలుష్య సమస్య.PCR ఉత్పత్తి యొక్క కాపీ పరిమాణం పెద్దది (సాధారణంగా 1013 కాపీలు/ml), ఇది PCR గుర్తింపు కాపీ సంఖ్య పరిమితి కంటే చాలా ఎక్కువ, PCR ఉత్పత్తి కాలుష్యం యొక్క అతి తక్కువ మొత్తం తప్పుడు పాజిటివ్‌లకు కారణం కావచ్చు.
ఏరోసోల్ కాలుష్యం అనేది PCR ఉత్పత్తుల యొక్క కలుషిత రూపం, మరియు ఇది విస్మరించబడటం కూడా చాలా సులభం.ఇది ద్రవ ఉపరితలం మరియు గాలి మధ్య ఘర్షణ ద్వారా ఏర్పడుతుంది.సాధారణంగా, మూత తెరిచినప్పుడు, నమూనా ఆశించినప్పుడు లేదా రియాక్షన్ ట్యూబ్ తీవ్రంగా కదిలినప్పుడు కూడా ఏరోసోల్ కాలుష్యం ఏర్పడుతుంది.లెక్కల ప్రకారం, ఒక ఏరోసోల్ కణం 48,000 కాపీలను కలిగి ఉంటుంది, కాబట్టి దాని వల్ల కలిగే కాలుష్యం ప్రత్యేక శ్రద్ధకు అర్హమైన సమస్య.
ప్రత్యేకించి, పరీక్షా ప్రయోగశాలలు తరచుగా ఒక నిర్దిష్ట జన్యువును పరీక్షించడానికి ఒకే జత ప్రైమర్‌లను ఉపయోగిస్తాయి.కాలక్రమేణా, ప్రయోగశాల స్థలంలో పెద్ద మొత్తంలో PCR ఉత్పత్తి కాలుష్యం ఏర్పడుతుంది.ఒకసారి అటువంటి కాలుష్యం సంభవించినట్లయితే, తక్కువ సమయంలో దానిని తొలగించడం కష్టం.
మొదటి మూడు రకాల కాలుష్యం కోసం, మేము నివారించడానికి సమర్థవంతమైన మార్గాలను ఉపయోగించవచ్చు, కానీ PCR ఉత్పత్తుల వల్ల కలిగే కాలుష్యాన్ని నివారించడం కష్టం, ముఖ్యంగా ప్రామాణికం కాని PCR ప్రయోగశాలల నిర్మాణంలో.PCR ప్రక్రియలో, పైపెట్ చిట్కా ద్రవాన్ని పీల్చినప్పుడు మరియు ఊదినప్పుడు, మరియు PCR ట్యూబ్ కవర్ తెరవబడినప్పుడు, ఒక ఏరోసోల్ ఏర్పడుతుంది.ఏరోసోల్ ద్వారా మోసుకెళ్ళే DNA అణువులు (ఒక ఏరోసోల్ పదివేల DNAలను మోయగలదు) గాలిలో తేలుతూ ఉండటం వలన వాటిని తొలగించడం కష్టం.తదుపరి రౌండ్ PCR ప్రయోగాలు ప్రవేశపెట్టిన తర్వాత, తప్పుడు పాజిటివ్‌లు అనివార్యంగా సంభవిస్తాయి.
దిగువ చిత్రంలో చూపిన విధంగా, ప్రతికూల నియంత్రణ సంబంధిత ఆసక్తిని కూడా విస్తరించింది:
PCR కాలుష్యం మరియు నివారణకు సంబంధించిన ఈ సమస్య యొక్క మొదటి భాగం ఇక్కడ పరిచయం చేయబడింది.తదుపరి సంచిక "PCR ఉత్పత్తి కాలుష్య నివారణ" రెండవ భాగాన్ని మీకు అందిస్తుంది, కాబట్టి వేచి ఉండండి!
పోస్ట్ సమయం: జూలై-25-2017
