పరిచయం:

RNA, శాస్త్రీయ నామం ribonucleic acid, దాని సంక్షిప్తీకరణ RiboNucleic Acid నుండి వచ్చింది, ఇది ఫాస్ఫోడీస్టర్ బంధాల ద్వారా కనీసం డజన్ల కొద్దీ రిబోన్యూక్లియోటైడ్‌లను అనుసంధానించడం ద్వారా ఏర్పడిన ఒక రకమైన న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం.

ఆర్‌ఎన్‌ఏను అన్వేషించే ఆవరణ కాలుష్య రహిత మొత్తం ఆర్‌ఎన్‌ఏను సంగ్రహించడం, మరియు ఆర్‌ఎన్‌ఏ వెలికితీత యొక్క ప్రాథమిక సూత్రాన్ని ఈ క్రింది విధంగా సంగ్రహించవచ్చు:

1. ముందుగా కణాలకు అంతరాయం కలిగించండి

2. అప్పుడు స్థూల కణ మలినాలను తొలగించండి (ప్రోటీన్లు, లిపిడ్లు, DNA మొదలైనవి)

3. చివరగా, లవణాలు మరియు సేంద్రీయ ద్రావకాలను తీసివేసేటప్పుడు మరియు RNAను మరింత శుద్ధి చేస్తున్నప్పుడు RNA అవక్షేపించబడుతుంది.

వెలికితీత పద్ధతి యొక్క గత మరియు ప్రస్తుత

మొదటి తరం RNA వెలికితీత పద్ధతి TRIzol అవక్షేప పద్ధతి (వాణిజ్య కారకాలలో గ్వానిడిన్ ఐసోథియోసైనేట్, ఫినాల్, క్లోరోఫామ్ మొదలైనవి ఉన్నాయి.) పియోటర్ చోమ్‌జిన్స్కి అనే తాత మరియు అమ్మమ్మ నికోలెట్టా సాచి కనుగొన్నారు, ఎందుకంటే ఈ ఆవిష్కరణ RNA వెలికితీత వేగంగా మరియు సులువుగా పరిశోధనను ప్రారంభించింది.

తరువాత, తాత ఈ పేటెంట్‌ను ఇన్విట్రోజెన్‌కు విక్రయించాడు మరియు ఇన్విట్రోజెన్ ఈ పద్ధతిని ప్రపంచానికి ప్రచారం చేసి విస్తృతంగా ఉపయోగించే పద్ధతిగా మారింది.

తరువాత, ఇన్విట్రోజెన్‌ను థర్మో కొనుగోలు చేసింది!

ప్రతినిధి ఉత్పత్తి: ఇన్విట్రోజెన్ యొక్క TRIzol రియాజెంట్

అయినప్పటికీ, TRIzol అవక్షేపణ పద్ధతికి బహుళ అవక్షేపణ మరియు RNA యొక్క వెలికితీత అవసరం, మరియు ఉపయోగించిన కారకాలు విషపూరితమైనవి మరియు పనిచేయడానికి చాలా సమయం పడుతుంది.

అందువల్ల, రెండవ తరం కాలమ్-ఎంజైమ్ శుద్దీకరణ పద్ధతి ఉనికిలోకి వచ్చింది, ఇతర మలినాలను తొలగించేటప్పుడు నమూనాలో RNA యొక్క రికవరీని పెంచడానికి సిలికా జెల్ పొరను నిర్దిష్ట న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ శోషణ పదార్థంగా ఉపయోగిస్తుంది.

రెండవ తరం పద్ధతి స్థిరమైన పనితీరు ఆధారంగా ఆపరేషన్‌ను సులభతరం చేస్తుంది, ప్రమాద కారకాన్ని తగ్గిస్తుంది మరియు RNA వెలికితీత సామర్థ్యాన్ని మెరుగుపరుస్తుంది.

ప్రతినిధి ఉత్పత్తులు: QIAGEN RNeasy మరియు చాలా దేశీయ ఉత్పత్తులు

అయినప్పటికీ, మొదటి మరియు రెండవ తరం పద్ధతులకు DNA కాలుష్యాన్ని తొలగించడానికి DNaseని ఉపయోగించడం అవసరం, ఇది తదుపరి దిగువ ప్రయోగాలకు కొంత అసౌకర్యాన్ని కలిగిస్తుంది.అవశేష DNase రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్ యొక్క సామర్థ్యాన్ని తగ్గిస్తుంది మరియు మొదటి-స్ట్రాండ్ cDNA సంశ్లేషణను తగ్గిస్తుంది, తద్వారా ఫలితాల ఖచ్చితత్వాన్ని ప్రభావితం చేస్తుంది.

అందువల్ల, మూడవ తరం వెలికితీత పద్ధతి రెండవ తరం ఆధారంగా ఆప్టిమైజ్ చేయబడింది.ప్రయోగానికి ఎటువంటి ఎంజైమ్‌లను జోడించాల్సిన అవసరం లేదు మరియు RNAను కేవలం రెండు నిలువు వరుసలతో సులభంగా పొందవచ్చు.

కాలమ్ 1: DNA క్లియర్ చేయడానికి DNA-క్లీనింగ్ కాలమ్

నిలువు వరుస 2: RNA-మాత్రమే కాలమ్ ప్రత్యేకంగా RNAను శోషిస్తుంది మరియు పునరుద్ధరిస్తుంది

ఇటువంటి సాధారణ ఆపరేషన్ సమయాన్ని ఆదా చేయడమే కాకుండా, దిగువ ప్రయోగాల ఆపరేషన్‌ను కూడా సులభతరం చేస్తుంది!

ప్రతినిధి ఉత్పత్తులు: QIAGEN RNeasy ప్లస్ మరియుఫోర్జీన్RNA శుద్ధి సిరీస్ ఉత్పత్తులు

(RNeasy ప్లస్)

(ఫోర్జీన్ యొక్కప్లాంట్ టోటల్ RNA ఐసోలేషన్ కిట్)

నిశ్శబ్దంగా చెప్పు!Foregene యొక్క RNA కిట్ కూడా ఒక సూపర్ సులభంగా ఉపయోగించగల RNase ఎరేజర్‌ను అందజేస్తుంది, ఇది మానవ శరీరానికి ఎటువంటి విషపూరిత పదార్థాలను జోడించకుండా, ఘన ఉపరితలంపై ఉన్న 400μg RNaseని 1 నిమిషంలో పూర్తిగా తొలగించగలదు!

చిత్రం1: ఆపరేషనల్ ప్రాసెస్ కంపారిజన్ చార్ట్

ఫోర్జీన్ యొక్క ఉత్పత్తులు కేవలం రెండు పాటల్లో RNA వెలికితీతను పూర్తి చేయగలవు, మీ ప్రయోగం పురోగతిని చూసి ఇతరులు అసూయపడేలా చేయవద్దు!

చిత్రం2:Eప్రయోగాత్మక ఫలితాలు పోలిక చార్ట్

మొదటి తరం (1: TRIzol)

రెండవ తరం (2: QIAGEN యొక్క RNeasy)

మూడవ తరం (3: QIAGEN యొక్క RNeasy ప్లస్, 4: ఫోర్జీన్)

చిత్రం3: qPCR గ్రాఫ్ (యాంప్లిఫికేషన్ కర్వ్ గ్రాఫ్)

మొదటి తరం (ఆకుపచ్చ అంటే TRIzol -, ఎరుపు అంటే TRIzol +)

రెండవ తరం (ఆకాశ నీలం అంటే QIAGEN RNeasy-, ఎరుపు అంటే QIAGEN RNeasy +)

మూడవ తరం (నీలం అంటే QIAGEN RNeasy ప్లస్, ఆకుపచ్చ అంటే ఫోర్జీన్)

(గమనిక: qPCR గ్రాఫ్ "-" DNase జోడించబడలేదని మరియు DNA కాలుష్యం తీసివేయబడలేదని సూచిస్తుంది. అందువల్ల, CT ఎక్కువగా ఉంది మరియు ఫలితం ఖచ్చితమైనది కాదు; "+" DNase జోడించబడిందని మరియు DNA కాలుష్యం తీసివేయబడిందని సూచిస్తుంది, ఫలితం ఖచ్చితమైనది)

ప్రతి సాంకేతిక అప్‌గ్రేడ్ అంటే ప్రయోగం యొక్క ఆపరేషన్ సరళమైన మరియు మరింత వినియోగదారు-స్నేహపూర్వక దిశలో అభివృద్ధి చెందుతుందని అర్థం.

Foregene మరింత శాస్త్రీయ పరిశోధకులకు ప్రయోగాత్మక సమయం మరియు వ్యయాన్ని ఆదా చేయడం, అధిక-నాణ్యత ప్రయోగాత్మక ఫలితాలను పొందడం మరియు సంయుక్తంగా మరింత విలువైన శాస్త్రీయ పరిశోధన విజయాలను రూపొందించడంలో సహాయపడటం లక్ష్యంగా పెట్టుకుంది.