రచయితలు: వాంగ్ జియోయాన్, జావో ఎర్యు

యూనిట్: జియాజో హాస్పిటల్, డాంగ్‌ఫాంగ్ హాస్పిటల్ టోంగ్జీ విశ్వవిద్యాలయానికి అనుబంధంగా ఉంది

ప్రస్తుతం, శ్వాసకోశ వ్యాధికారక న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ గుర్తింపు కోసం ప్రధాన నమూనా రకం గొంతు శుభ్రముపరచు.సాధారణంగా ఉపయోగించే అనేక రకాల నమూనా సంరక్షణ పరిష్కారాలు ఉన్నాయి, ఇవన్నీ రవాణా మరియు నిల్వ కోసం శీతలీకరించబడాలి లేదా స్తంభింపజేయాలి;సేకరణ మరియు రవాణా ప్రక్రియలో తక్కువ ఉష్ణోగ్రత యొక్క మొత్తం ప్రక్రియను నియంత్రించడం కష్టం మరియు నమూనా పరీక్షకు ముందు నాణ్యత నియంత్రణను నిర్ధారించడం కష్టం^[1-2].

RNase (RNase) అనేది ఒక ఎండోన్యూక్లీస్, ఇది RNAను హైడ్రోలైజ్ చేస్తుంది, ప్రధానంగా న్యూక్లియోటైడ్‌ల మధ్య ఫాస్ఫోడీస్టర్ బంధాలను విడదీస్తుంది.RNase అణువు చాలా స్థిరంగా ఉంటుంది, నిర్మాణంలో డైసల్ఫైడ్ బంధాలు ఉన్నాయి మరియు దాని కార్యాచరణకు డైవాలెంట్ కాటయాన్‌ల ఉనికి అవసరం లేదు, కాబట్టి RNase సులభంగా డీనాట్ చేయబడదు మరియు అధిక ఉష్ణోగ్రత లేదా డీనాట్యురెంట్‌ల వాడకం తర్వాత కూడా రీనేచర్ చేయడం సులభం.RNaseలు అంతర్జాత మరియు బాహ్యంగా విభజించబడ్డాయి.కణాలు చీలిపోయినప్పుడు అంతర్జాత RNases అదే సమయంలో విడుదల చేయబడతాయి.కాబట్టి, RNA వెలికితీత ప్రక్రియలో అంతర్జాత RNases పాత్రను తొలగించడం చాలా క్లిష్టమైన దశ.ఎక్సోజనస్ RNases విస్తృతంగా పంపిణీ చేయబడ్డాయి.RNaseలు గాలి, మానవ చర్మం, జుట్టు మరియు లాలాజలంలో ఉన్నాయి, ఇవి RNA యొక్క సులభంగా క్షీణతకు ముఖ్యమైన కారణాలు^[3].

డేటా ప్రశ్న

CANS-CL02-A009 సాంకేతిక అవసరాలలో “మాలిక్యులర్ డయాగ్నోసిస్ రంగంలో మెడికల్ లాబొరేటరీ నాణ్యత మరియు యోగ్యత అక్రిడిటేషన్ మార్గదర్శకాల అప్లికేషన్” అప్లికేషన్ ప్రకారం తగిన నీటి నాణ్యత ప్రమాణాలను రూపొందించాలని ప్రతిపాదిస్తుంది;పునర్వినియోగపరచలేని గాలి చొరబడని కంటైనర్లు:

RNase/వర్గీకరణ

(1) RNase A

రిబోన్యూక్లీస్ A (RNase A), బోవిన్ ప్యాంక్రియాస్ నుండి తీసుకోబడింది, ఇది ఒక ఎండోరిబోన్యూక్లీస్, ఇది RNAపై 3′ పిరిమిడిన్ అవశేషాలపై దాడి చేయగలదు, సైటోసిన్ లేదా యురేసిల్‌ను ప్రక్కనే ఉన్న న్యూక్లియోటైడ్‌ల ద్వారా కత్తిరించడం.ఫాస్ఫోడీస్టర్ బంధం, ప్రతిచర్య యొక్క తుది ఉత్పత్తి 3′ పిరిమిడిన్ న్యూక్లియోటైడ్ మరియు చివరలో 3′ పిరిమిడిన్ న్యూక్లియోటైడ్‌తో ఒలిగోన్యూక్లియోటైడ్.

(2) RNase T1

Ribonuclease T1 (RNase T1) Aspergillus orjzae నుండి తీసుకోబడింది, ఇది ప్రత్యేకంగా గ్వానైన్ యొక్క 3′-టెర్మినల్ ఫాస్ఫేట్‌పై పనిచేస్తుంది మరియు క్లీవేజ్ సైట్ 3′ ఫాస్ఫేట్ గ్వానైన్ మరియు 5′ హైడ్రాక్సిల్ ప్రక్కనే ఉన్న న్యూక్లియోటైడ్‌ల మధ్య ఉంటుంది.ప్రతిచర్య యొక్క తుది ఉత్పత్తి 3′గ్వానైలిక్ ఆమ్లం మరియు ఒలిగోన్యూక్లియోటైడ్ శకలాలు 3′గ్వానైలిక్ ఆమ్లం చివరన ఉంటాయి.

(3) RNase H

Ribonuclease H (RNase H) మొట్టమొదట దూడ థైమస్ కణజాలం నుండి కనుగొనబడింది మరియు దాని ఎన్‌కోడింగ్ జన్యువు ఎస్చెరిచియా కోలిలోకి క్లోన్ చేయబడింది.ఇది ప్రత్యేకంగా DNAను క్షీణింపజేస్తుంది: RNA హైబ్రిడ్ డ్యూప్లెక్స్‌లలోని RNA తంతువులు, ఫలితంగా 3′-OH మరియు 5′-మోనోఫాస్ఫేట్ చివరలతో ఒలిగోన్యూక్లియోటైడ్‌లు మరియు మోనోన్యూక్లియోటైడ్‌లు ఏర్పడతాయి, ఇది సింగిల్-లేదా డబుల్ స్ట్రాండెడ్ DNA లేదా RNAని క్షీణింపజేయదు.

RNase

ఫంక్షన్ మరియు ఉపయోగం

రిబోన్యూక్లీస్ రిబోన్యూక్లియిక్ యాసిడ్ (RNA) యొక్క క్షీణతను ఉత్ప్రేరకపరుస్తుంది మరియు కృత్రిమంగా సంశ్లేషణ చేయబడుతుంది.గాయం మరియు కీళ్ల నొప్పులకు చికిత్స చేయడానికి ఔషధ లేపనం స్థానికంగా ఉపయోగించబడుతుంది.నివేదికల ప్రకారం, రిబోన్యూక్లీస్ హోస్ట్ సెల్ జీవక్రియను మార్చగలదు, వైరస్ సంశ్లేషణను నిరోధిస్తుంది, ఇన్ఫ్లుఎంజా వైరస్ ఇన్ విట్రో యొక్క విస్తరణను నిరోధిస్తుంది మరియు కోడి పిండాలలో వ్యాక్సినియా మరియు హెర్పెస్ వైరస్ ఏర్పడటాన్ని నిరోధిస్తుంది.ribonuclease రోజువారీ ఇంట్రామస్కులర్ ఇంజెక్షన్ 180 mg యొక్క క్లినికల్ ఉపయోగం, అంటువ్యాధి మెదడువాపు చికిత్సకు ప్రయోజనకరంగా ఉంటుంది, ribonuclease రిబోన్యూక్లిక్ యాసిడ్ (RNA) క్షీణతను ఉత్ప్రేరకపరుస్తుంది మరియు ఇప్పుడు కృత్రిమంగా సంశ్లేషణ చేయబడుతుంది.గాయం మరియు కీళ్ల నొప్పులకు చికిత్స చేయడానికి ఔషధ లేపనం స్థానికంగా ఉపయోగించబడుతుంది.నివేదికల ప్రకారం, రిబోన్యూక్లీస్ హోస్ట్ సెల్ జీవక్రియను మార్చగలదు, వైరస్ సంశ్లేషణను నిరోధిస్తుంది, ఇన్ఫ్లుఎంజా వైరస్ ఇన్ విట్రో యొక్క విస్తరణను నిరోధిస్తుంది మరియు కోడి పిండాలలో వ్యాక్సినియా మరియు హెర్పెస్ వైరస్ ఏర్పడటాన్ని నిరోధిస్తుంది.రిబోన్యూక్లీస్ రోజువారీ ఇంట్రామస్కులర్ ఇంజెక్షన్ 180 mg యొక్క క్లినికల్ ఉపయోగం ఎపిడెమిక్ ఎన్సెఫాలిటిస్ చికిత్సకు ప్రయోజనకరంగా ఉంటుంది.

RNase

ఇన్హిబిటర్ నిర్వచనం

RNase ఇన్హిబిటర్ యూనిట్ యొక్క నిర్వచనం: 5ng RNase A యొక్క 50% కార్యాచరణను నిరోధించడానికి అవసరమైన ఎంజైమ్ మొత్తం ఒక యూనిట్.

RNase ఇన్హిబిటర్స్ ఎలా పని చేస్తాయి

గ్వానిడిన్ ఐసోథియోసైనేట్:

గ్వానిడిన్ ఐసోథియోసైనేట్ అనేది C2H6N4S అనే పరమాణు సూత్రంతో కూడిన కర్బన సమ్మేళనం.ప్రధానంగా బయోలాజికల్ మెడిసిన్, కెమికల్ రియాజెంట్‌లు మొదలైన వాటిలో ఉపయోగించబడుతుంది. గ్వానిడిన్ ఐసోథియోసైనేట్ అనేది ప్రోటీన్ లైసింగ్ ఏజెంట్, మరియు ఇది తరచుగా మాలిక్యులర్ డయాగ్నస్టిక్ రియాజెంట్‌లలో లైసిస్ సొల్యూషన్‌లో ప్రధాన భాగం వలె ఉపయోగించబడుతుంది.ఇది కణజాలాన్ని లైస్ చేయగలదు, కణ నిర్మాణాన్ని నాశనం చేస్తుంది మరియు న్యూక్లియోప్రొటీన్ నుండి న్యూక్లియిక్ యాసిడ్‌ను విడదీస్తుంది మరియు RNaseకి బలమైన డీనాటరేషన్ కలిగి ఉంటుంది.ఇది ప్రస్తుతం అత్యంత ప్రభావవంతమైన RNase నిరోధకం.

TRIzol అనేది ఒక నవల మొత్తం RNA వెలికితీత రియాజెంట్, ఇది కణాలు లేదా కణజాలాల నుండి మొత్తం RNAని నేరుగా సంగ్రహించగలదు.ఇది ఫినాల్ మరియు గ్వానిడైన్ ఐసోథియోసైనేట్ వంటి పదార్ధాలను కలిగి ఉంటుంది, ఇది కణాలను వేగంగా దెబ్బతీస్తుంది మరియు కణాల ద్వారా విడుదలయ్యే న్యూక్లియస్‌లను నిరోధిస్తుంది.

(అయితే, గ్వానిడైన్ ఐసోథియోసైనేట్ ప్రయోగశాల పరిశోధకుల ఆరోగ్యానికి ప్రమాదకరం.)

RNasin:

ఎలుక కాలేయం లేదా మానవ బ్లాస్టోడెర్మ్ నుండి సేకరించిన యాసిడ్ గ్లైకోప్రొటీన్.Rnasin అనేది RNase యొక్క నాన్-కాంపిటీటివ్ ఇన్హిబిటర్, ఇది వాటిని నిష్క్రియం చేయడానికి వివిధ RNaseలను బంధించగలదు.

(మరిన్ని వివరాలు:https://www.foreivd.com/foreasy-rnase-inhibitor-product/)

Hఅధిక ఉష్ణోగ్రత:

అధిక ఉష్ణోగ్రత అనేది ప్రోటీన్ డీనాటరేషన్ యొక్క సాధారణ సాధనం.

డైథైల్పైరోకార్బోనేట్ (DEPC):

DEPC అనేది బలమైన కానీ అసంపూర్ణమైన RNase నిరోధకం, ఇది RNase క్రియాశీల సమూహంలోని అమినో యాసిడ్ ఇమిడాజోల్ రింగ్‌తో ప్రోటీన్లను డీనేచర్ చేయడం ద్వారా RNase కార్యాచరణను నిరోధించగలదు.

వనడైల్ రిబోన్యూక్లియోసైడ్ కాంప్లెక్స్:

వెనాడియం ఆక్సైడ్ అయాన్లు మరియు న్యూక్లియోసైడ్‌లచే ఏర్పడిన కాంప్లెక్స్, ఇది పరివర్తన పదార్థాల రూపంలో RNaseతో బంధిస్తుంది, ఇది RNase యొక్క కార్యాచరణను దాదాపు పూర్తిగా నిరోధించగలదు.

ఇతర:

SDS, యూరియా, డయాటోమాసియస్ ఎర్త్ మొదలైనవి కూడా RNaseపై నిర్దిష్ట నిరోధక ప్రభావాన్ని కలిగి ఉంటాయి.

నిపుణుల సమీక్షలు

లీ యుజీ చీఫ్ టెక్నీషియన్

లాబొరేటరీ డిపార్ట్‌మెంట్ డైరెక్టర్, జియాజో హాస్పిటల్, డాంగ్‌ఫాంగ్ హాస్పిటల్ టోంగ్జీ విశ్వవిద్యాలయానికి అనుబంధంగా

ఎక్సోజనస్ RNase యొక్క బయోడిగ్రేడేషన్‌ను నివారించడానికి, RNA వెలికితీత ప్రక్రియలో ముసుగులు, చేతి తొడుగులు మరియు టోపీలను తరచుగా ధరించాలి మరియు భర్తీ చేయాలి.అన్ని గాజుసామాను తప్పనిసరిగా 200 ° C వద్ద 2 గంటల కంటే ఎక్కువ ఆరబెట్టే ఓవెన్‌లో కాల్చాలి.బేకింగ్ కోసం ఉపయోగించే ప్లాస్టిక్ వంటి పదార్థాలను DEPC నీటితో శుద్ధి చేయాలి, ఆపై స్వేదనజలంతో కడగాలి.RNA యొక్క వెలికితీత, సంరక్షణ మరియు గుర్తింపు కోసం ఉపయోగించే కారకాలు లేదా పరికరాలు RNAకి అంకితం చేయబడాలి మరియు స్వతంత్ర RNA ఆపరేషన్ ప్రాంతం ఏర్పాటు చేయాలి.

ప్రస్తావనలు:

[1] స్మిత్-వాఘన్ HC, బింక్స్ MJ, బీస్‌బర్త్ J, మరియు ఇతరులు.స్వదేశీ ఆస్ట్రేలియన్ పిల్లలలో[J] తీవ్రమైన లోయర్ రెస్పిరేటరీ ఇన్‌ఫెక్షన్లు రావడానికి ముందు వెంటనే నాసోఫారెక్స్‌లో బాక్టీరియా మరియు వైరస్‌లు.Eur J క్లిన్ మైక్రోబయోల్ ఇన్ఫెక్ట్ డిస్,2018,37 (9): 1785-1794.

[2] చైనీస్ ప్రివెంటివ్ మెడిసిన్ అసోసియేషన్ యొక్క హాస్పిటల్ ఇన్ఫెక్షన్ కంట్రోల్ బ్రాంచ్.క్లినికల్ మైక్రోబియల్ నమూనాల సేకరణ మరియు తనిఖీ కోసం మార్గదర్శకాలు [J].చైనీస్ జర్నల్ ఆఫ్ హాస్పిటల్ ఇన్ఫెక్షన్, 2018(20):3192-3200.

[3] “క్లినికల్ టెస్ట్ టెన్ థౌజండ్ ఎందుకు మాలిక్యులర్ బయాలజీ టెస్ట్ వాల్యూమ్”