1: ప్రయోగాత్మక సామాగ్రిని సమయానికి భర్తీ చేయండి

(NTC) ప్రతికూల నియంత్రణను సెటప్ చేయండి మరియు దీన్ని చాలాసార్లు పునరావృతం చేయండి.ప్రయోగశాలలో PCR ఉత్పత్తి కాలుష్యం ఉన్నట్లు గుర్తించిన తర్వాత, అన్ని ప్రయోగాత్మక సరఫరాలను సమయానికి భర్తీ చేయండి.ఇటువంటివి: ప్రైమర్‌లను మళ్లీ పలచగా చేసి సిద్ధం చేయడం, పైపెట్ చిట్కా, EP ట్యూబ్, ddH2O మొదలైన వాటిని మళ్లీ క్రిమిరహితం చేయడం, కొత్త పైపెట్‌తో భర్తీ చేయడం మరియు PCR ప్రయోగాలు చేయడానికి ఇతర ప్రయోగశాలలను తాత్కాలికంగా తీసుకోవడం.ప్రయోగాన్ని కొనసాగించే ముందు PCR ఉత్పత్తి కాలుష్యం తొలగించబడే వరకు కలుషితమైన ప్రయోగశాలను అతినీలలోహిత కిరణాలతో వెంటిలేషన్ చేయాలి మరియు వికిరణం చేయాలి.

2: UV ఎక్స్పోజర్ సమయాన్ని పొడిగించండి

DNA కాలుష్యాన్ని తొలగించడానికి, సాధారణ అతినీలలోహిత వికిరణాన్ని సాధారణం కంటే 2 గంటలు పొడిగించాలని గమనించాలి.అయినప్పటికీ, DNA కాలుష్యం యొక్క చిన్న శకలాలు (200bp కంటే తక్కువ) తొలగించడంలో UV వికిరణం ప్రభావం ఇప్పటికీ మంచిది కాదు.

అతినీలలోహిత తరంగదైర్ఘ్యం (nm) సాధారణంగా 254/300nm, మరియు ఇది 30 నిమిషాల పాటు వికిరణం చేయడానికి సరిపోతుంది.అవశేష PCR ఉత్పత్తుల కాలుష్యాన్ని తొలగించడానికి UVని ఎంచుకున్నప్పుడు, PCR ఉత్పత్తి యొక్క పొడవు మరియు ఉత్పత్తి క్రమంలో స్థావరాల పంపిణీని పరిగణించాలని గమనించాలి.UV వికిరణం 500 bp కంటే ఎక్కువ పొడవాటి శకలాలు మాత్రమే ప్రభావవంతంగా ఉంటుంది మరియు చిన్న శకలాలపై తక్కువ ప్రభావం చూపుతుంది.

UV వికిరణం సమయంలో, PCR ఉత్పత్తిలోని పిరిమిడిన్ స్థావరాలు డైమర్‌లను ఏర్పరుస్తాయి.ఈ డైమర్‌లు పొడిగింపును ముగించగలవు, కానీ DNA గొలుసులోని అన్ని పిరిమిడిన్‌లు డైమర్‌లను ఏర్పరచలేవు మరియు UV వికిరణం కూడా డైమర్‌లను విచ్ఛిన్నం చేస్తుంది..డైమర్ ఏర్పడే డిగ్రీ UV తరంగదైర్ఘ్యం, పిరిమిడిన్ డైమర్ రకం మరియు డైమర్ సైట్‌కు ఆనుకుని ఉన్న న్యూక్లియోటైడ్‌ల క్రమం మీద ఆధారపడి ఉంటుంది.అందువల్ల, PCR విస్తరించిన శకలాలు చిన్నవిగా ఉంటే, UNG యాంటీ-పిసిఆర్ ఉత్పత్తి కాలుష్య వ్యవస్థను ఉపయోగించమని సిఫార్సు చేయబడింది.

3:సాధారణంగా ఉపయోగించే DNA కాలుష్య స్కావెంజర్లు

పైపెట్‌లను జోడించినప్పుడు ఏరోసోల్‌లు సులభంగా ఉత్పత్తి చేయబడతాయి, ఇది నివారించడం కష్టం మరియు ఇది త్వరగా స్థిరపడుతుంది.అందువల్ల, DNA కాలుష్యం వ్యాప్తి చెందకుండా నిరోధించడానికి ప్రత్యేక DNA కాలుష్య స్కావెంజర్‌లను తరచుగా ఉపయోగించడం నిస్సందేహంగా మంచి ఎంపిక.

4: UNG కాలుష్య నిరోధక వ్యవస్థను ఉపయోగించండి

PCR ఉత్పత్తి కాలుష్యం తొలగించబడిన తర్వాత, పరీక్షా ప్రయోగశాల PCR ఉత్పత్తి కాలుష్యాన్ని నిరోధించడానికి UNG యాంటీ-పిసిఆర్ ఉత్పత్తి కాలుష్య వ్యవస్థను ఉపయోగించవచ్చు.సాధారణ ప్రయోగశాలలలో, మీరు సాధారణ ప్రయోగాత్మక విభజనలను నిర్వహించవచ్చు, ఇతర ప్రాంతాల నుండి PCR ఉత్పత్తి ప్రాంతాన్ని ఖచ్చితంగా వేరు చేయవచ్చు, కొన్ని ప్రయోగశాల నియమాలు మరియు నిబంధనలను ఏర్పాటు చేయవచ్చు మరియు PCR ఉత్పత్తి కాలుష్యం సంభవించకుండా నిరోధించడానికి సంబంధిత శిక్షణను నిర్వహించవచ్చు.

సిఫార్సులు: సహేతుకమైన PCR ప్రయోగశాలను నెలకొల్పడం, మంచి PCR వాతావరణాన్ని నిర్వహించడం, ప్రామాణిక PCR ఆపరేటింగ్ విధానాలను రూపొందించడం మరియు ప్రయోగాత్మకుల యొక్క కఠినమైన కార్యాచరణ అవగాహనను పెంపొందించడం PCR ప్రయోగాల కాలుష్యాన్ని నిరోధించడానికి లేదా తగ్గించడానికి కీలకమైనవి.