వ్యాప్తి ప్రారంభ దశలో, వేగవంతమైన అభివృద్ధి కారణంగా, అనుమానిత రోగుల యొక్క వేగవంతమైన రోగనిర్ధారణ COVID-19ని నివారించడంలో కీలకం.కొన్ని ఆమోదించబడిన న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ డిటెక్షన్ రియాజెంట్‌లు తక్కువ అభివృద్ధి సమయాన్ని కలిగి ఉంటాయి మరియు త్వరితగతిన పనితీరు నిర్ధారణ, తగినంత రియాజెంట్ ఆప్టిమైజేషన్ మరియు బ్యాచ్‌ల మధ్య పెద్ద తేడాలు వంటి సమస్యలు ఉన్నాయి;న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ గుర్తింపు ప్రక్రియ యొక్క వివిధ అంశాలలో వివిధ క్లినికల్ లాబొరేటరీల సమస్యలు కూడా న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ గుర్తింపు ఫలితాల యొక్క ఖచ్చితత్వాన్ని ప్రభావితం చేయవచ్చు.ఈ కథనం ప్రస్తుత SARS-CoV-2 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ డిటెక్షన్‌లోని కీలక లింక్‌లు మరియు పాయింట్‌లపై దృష్టి పెడుతుంది మరియు లాబొరేటరీ న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ డిటెక్షన్ మరియు క్లినికల్ అస్థిరత యొక్క తప్పుడు ప్రతికూల మరియు సానుకూల పునఃపరిశీలన సమస్యలను విశ్లేషిస్తుంది.

SARS-CoV-2 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ డిటెక్షన్ సూత్రాలు

SARS-CoV-2 అనేది దాదాపు 29 kb జీనోమ్ సీక్వెన్స్‌తో 10 జన్యువులతో కూడిన RNA వైరస్, ఇది 10 ప్రోటీన్‌లను సమర్థవంతంగా ఎన్‌కోడ్ చేయగలదు.వైరస్‌లు RNA మరియు ప్రోటీన్‌లతో కూడి ఉంటాయి మరియు బయటి పొర లిపిడ్‌లు మరియు గ్లైకోప్రొటీన్‌లతో కూడిన బయటి పూత.లోపల, ప్రోటీన్ క్యాప్సిడ్ దానిలో RNA ను చుట్టి, తద్వారా సులభంగా క్షీణించగల RNA (P1)ని రక్షిస్తుంది.

SARS-COV-2 యొక్క P1 నిర్మాణం

వైరస్‌లు నిర్దిష్ట సెల్ ఉపరితల గ్రాహకాల ద్వారా కణాలపై దాడి చేసి ఇన్‌ఫెక్షన్‌కు కారణమవుతాయి మరియు పునరావృతం చేయడానికి హోస్ట్ కణాలను ఉపయోగిస్తాయి.

వైరల్ న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ డిటెక్షన్ సూత్రం సెల్ లైసేట్ ద్వారా వైరల్ ఆర్‌ఎన్‌ఏను బహిర్గతం చేయడం, ఆపై గుర్తించడం కోసం రియల్ టైమ్ ఫ్లోరోసెంట్ రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్-పాలిమరేస్ చైన్ రియాక్షన్ (RT-PCR)ని ఉపయోగించడం.

న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ సీక్వెన్స్‌ల “టార్గెటెడ్ మ్యాచింగ్” సాధించడానికి ప్రైమర్‌లు మరియు ప్రోబ్‌లను ఉపయోగించడం, అంటే, ఇతర వైరస్‌ల కంటే దాదాపు 30,000 బేస్‌లలో ఉండే SARS-CoV-2 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ సీక్వెన్స్‌ను కనుగొనడం (ఇతర వైరస్‌లతో న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ సారూప్యత) “ప్రైమర్‌ల రూపకల్పన.

ప్రైమర్‌లు మరియు ప్రోబ్‌లు SARS-CoV-2 న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం యొక్క నిర్దిష్ట ప్రాంతంతో బాగా సరిపోలాయి, అంటే నిర్దిష్టత చాలా బలంగా ఉంది.ఒకసారి పరీక్షించాల్సిన నమూనా యొక్క నిజ-సమయ ఫ్లోరోసెంట్ RT-PCR యాంప్లిఫికేషన్ ఫలితం సానుకూలంగా ఉంటే, ఇది నమూనాలో SARS-CoV-2 ఉందని రుజువు చేస్తుంది.P2 చూడండి.

SARS-CoV-2 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ నిర్ధారణ యొక్క P2 దశలు (రియల్-టైమ్ ఫ్లోరోసెంట్ RT-PCR)

SARS-CoV-2 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ గుర్తింపు కోసం ప్రయోగశాల యొక్క పరిస్థితులు మరియు అవసరాలు

న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్షా ప్రయోగశాలలు ప్రతికూల పీడన వాతావరణాలకు అత్యంత అనువైనవి, మరియు అవి ఒత్తిడి పర్యవేక్షణకు శ్రద్ధ వహించాలి, గాలిని ప్రవహింపజేయాలి మరియు ఏరోసోల్‌లను తొలగించాలి.న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ టెస్టింగ్ సిబ్బంది తప్పనిసరిగా సంబంధిత అర్హతలను కలిగి ఉండాలి, సంబంధిత పాలిమరేస్ చైన్ రియాక్షన్ శిక్షణను పొందాలి మరియు అసెస్‌మెంట్‌లో ఉత్తీర్ణత సాధించాలి.ప్రయోగశాల ఖచ్చితంగా నిర్వహించబడాలి, స్థలంలో జోన్ చేయాలి మరియు అసంబద్ధమైన సిబ్బంది ప్రవేశించకుండా ఖచ్చితంగా నిషేధించబడ్డారు.శుభ్రమైన ప్రదేశంలో వెంటిలేషన్ చేయాలి మరియు క్రిమిసంహారక చేయాలి.సంబంధిత వస్తువులు జోన్‌లలో ఉంచబడతాయి, శుభ్రంగా మరియు మురికిగా వేరు చేయబడతాయి, సమయానికి భర్తీ చేయబడతాయి మరియు స్థానంలో కలుషితం చేయబడతాయి.సాధారణ క్రిమిసంహారక: క్లోరిన్-కలిగిన క్రిమిసంహారక పెద్ద ప్రాంతాలకు ప్రధాన పరిష్కారం, మరియు 75% ఆల్కహాల్ చిన్న ప్రాంతాలకు ఉపయోగించవచ్చు.ఏరోసోల్‌లను ఎదుర్కోవటానికి మంచి మార్గం వెంటిలేషన్ కోసం కిటికీలను తెరవడం మరియు అతినీలలోహిత కిరణాలు, వడపోత మరియు గాలి క్రిమిసంహారక ద్వారా గాలి క్రిమిసంహారక కూడా నిర్వహించబడుతుంది.

SARS-CoV-2 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ నిర్ధారణ యొక్క ముఖ్య లింక్‌లు మరియు పారామితులు (రియల్-టైమ్ ఫ్లోరోసెంట్ RT-PCR)

ప్రయోగశాలలు సాధారణంగా న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ "డిటెక్షన్" పై చాలా శ్రద్ధ వహిస్తున్నప్పటికీ, వాస్తవానికి, న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ "సంగ్రహణ" కూడా విజయవంతమైన గుర్తింపు కోసం కీలక దశల్లో ఒకటి, ఇది వైరస్ నమూనాల సేకరణ మరియు నిల్వకు దగ్గరి సంబంధం కలిగి ఉంటుంది.

ప్రస్తుతం, నాసోఫారింజియల్ స్వాబ్స్ వంటి అత్యంత విస్తృతంగా ఉపయోగించే శ్వాసకోశ నమూనాలు రెండవ పద్ధతిని ఉపయోగిస్తాయి, ఇది న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ వెలికితీత మరియు లైసిస్ సొల్యూషన్ ఆధారంగా తయారు చేయబడిన క్రియారహితం (సంరక్షణ) పరిష్కారం.ఒక వైపు, ఈ వైరస్ సంరక్షణ పరిష్కారం వైరస్ యొక్క ప్రొటీన్‌ను తగ్గించగలదు, దాని కార్యాచరణను కోల్పోతుంది మరియు ఇకపై అంటువ్యాధిగా ఉండదు మరియు రవాణా మరియు గుర్తింపు దశ యొక్క భద్రతను మెరుగుపరుస్తుంది;మరోవైపు, న్యూక్లియిక్ యాసిడ్‌ను విడుదల చేయడానికి, న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ కుళ్ళిపోయే ఎంజైమ్‌ను తొలగించడానికి మరియు వైరస్‌ను నిరోధించడానికి ఇది నేరుగా వైరస్‌ను పగులగొడుతుంది.RNA క్షీణించింది.

న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ ఎక్స్‌ట్రాక్షన్ లైసిస్ సొల్యూషన్ ఆధారంగా తయారు చేయబడిన వైరస్ నమూనా పరిష్కారం.ప్రధాన భాగాలు సమతుల్య లవణాలు, ఇథిలీనెడియమినెట్రాఅసిటిక్ యాసిడ్ చెలాటింగ్ ఏజెంట్, గ్వానిడిన్ ఉప్పు (గ్వానిడిన్ ఐసోథియోసైనేట్, గ్వానిడిన్ హైడ్రోక్లోరైడ్ మొదలైనవి), అయానిక్ సర్ఫ్యాక్టెంట్ (డోడెకేన్) సోడియం సల్ఫేట్), కాటినిక్ సర్ఫ్యాక్టెంట్ (టెట్రాడెసైల్ ఆక్సిలిన్, హైడ్రాడెసిల్, హైడ్రాడెసిల్, హైడ్రాడెసిల్, హైడ్రాడెసిల్, హైడ్రాడిసైల్, 8. othreitol, ప్రొటీనేజ్ K మరియు ఇతర అనేక లేదా అంతకంటే ఎక్కువ భాగాలు.ప్రస్తుతం, అనేక రకాల న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ ఎక్స్‌ట్రాక్షన్ కిట్‌లు ఉన్నాయి మరియు వివిధ న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ ఎక్స్‌ట్రాక్షన్ మరియు ప్యూరిఫికేషన్ రియాజెంట్‌లు ఉపయోగించబడుతున్నాయి.అదే న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ వెలికితీత మరియు శుద్ధీకరణ రియాజెంట్ ఉపయోగించినప్పటికీ, ప్రతి కిట్ యొక్క వెలికితీత విధానాలు భిన్నంగా ఉంటాయి.

ప్రస్తుతం, నేషనల్ మెడికల్ ప్రొడక్ట్స్ అడ్మినిస్ట్రేషన్ ఆమోదించిన న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ డిటెక్షన్ కిట్ ఉత్పత్తులు SARS-CoV-2 జన్యువులోని ORF1ab, E మరియు N జన్యువుల ఆధారంగా ఎంపిక చేయబడ్డాయి.విభిన్న ఉత్పత్తుల గుర్తింపు సూత్రాలు ప్రాథమికంగా ఒకే విధంగా ఉంటాయి, కానీ వాటి ప్రైమర్‌లు మరియు ప్రోబ్ డిజైన్‌లు భిన్నంగా ఉంటాయి.సింగిల్-టార్గెట్ విభాగాలు (ORF1ab), ద్వంద్వ-లక్ష్య విభాగాలు (ORF1ab, N లేదా E) మరియు మూడు-లక్ష్య విభాగాలు (ORF1ab, N మరియు E) ఉన్నాయి.డిటెక్షన్ మరియు ఇంటర్‌ప్రెటేషన్, న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ ఎక్స్‌ట్రాక్షన్ మరియు రియల్-టైమ్ ఫ్లోరోసెంట్ RT-PCR రియాక్షన్ సిస్టమ్ మధ్య వ్యత్యాసం సంబంధిత కిట్ సూచనలను సూచించాలి మరియు వినియోగదారులు వ్యాఖ్యానం కోసం కిట్ సూచనలలో పేర్కొన్న వివరణ పద్ధతిని ఖచ్చితంగా అనుసరించాలని సిఫార్సు చేయబడింది.నిజ-సమయ ఫ్లోరోసెంట్ RT-PCR ద్వారా విస్తరించబడిన సాధారణ ప్రాంతాలు, ప్రైమర్‌లు మరియు ప్రోబ్ సీక్వెన్సులు P3లో చూపబడ్డాయి.

P3 జన్యువుపై SARS-CoV-2 యాంప్లికాన్ లక్ష్యం యొక్క స్థానం మరియు ప్రైమర్‌లు మరియు ప్రోబ్స్ క్రమం

SARS-CoV-2 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ నిర్ధారణ ఫలితాల వివరణ (Rఈల్-Time ఫ్లోరోసెంట్ RT-PCR)

"SARS-CoV-2 ఇన్ఫెక్షన్ కోసం న్యుమోనియా నివారణ మరియు నియంత్రణ ప్రణాళిక (రెండవ ఎడిషన్)" మొదటిసారిగా ఒకే జన్యు విస్తరణ ఫలితాలను నిర్ధారించే ప్రమాణాలను స్పష్టం చేసింది:

1. ఏ Ct లేదా Ct≥40 ప్రతికూలంగా లేదు;

2. Ct<37 పాజిటివ్;

3. Ct విలువ 37-40 బూడిద-స్థాయి ప్రాంతం.ప్రయోగాన్ని పునరావృతం చేయాలని సిఫార్సు చేయబడింది.Ct<40 మరియు యాంప్లిఫికేషన్ కర్వ్‌ని మళ్లీ చేయడం వల్ల వచ్చే ఫలితాలు స్పష్టమైన శిఖరాలను కలిగి ఉంటే, నమూనా సానుకూలంగా నిర్ణయించబడుతుంది, లేకుంటే అది ప్రతికూలంగా ఉంటుంది.

గైడ్ యొక్క మూడవ ఎడిషన్ మరియు గైడ్ యొక్క నాల్గవ ఎడిషన్ పై ప్రమాణాలను కొనసాగించాయి.అయితే, వాణిజ్య వస్తు సామగ్రిలో ఉపయోగించే విభిన్న లక్ష్యాల కారణంగా, పైన పేర్కొన్న 3వ ఎడిషన్ గైడ్ లక్ష్యాల కలయికను నిర్ణయించడానికి ప్రమాణాలను అందించలేదు, తయారీదారు అందించిన సూచనలను నొక్కిచెప్పారు.మార్గదర్శకాల యొక్క ఐదవ ఎడిషన్ నుండి ప్రారంభించి, రెండు లక్ష్యాలు స్పష్టం చేయబడ్డాయి, ప్రత్యేకించి నిర్ధారించడం కష్టతరమైన ఒకే లక్ష్యానికి సంబంధించిన తీర్పు ప్రమాణాలు.అంటే, SARS-CoV-2 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ డిటెక్షన్‌కు కేసు సానుకూలంగా ఉందని ప్రయోగశాల నిర్ధారించాలనుకుంటే, ఈ క్రింది 2 షరతులలో 1కి అనుగుణంగా ఉండాలి:

(1) ఒకే నమూనాలోని SARS-CoV-2 (ORF1ab, N) యొక్క రెండు లక్ష్యాలు నిజ-సమయ ఫ్లోరోసెంట్ RT-PCR ద్వారా పాజిటివ్‌గా పరీక్షించబడ్డాయి.ఒకే లక్ష్యం సానుకూలంగా ఉంటే, తిరిగి నమూనా మరియు పునఃపరీక్ష అవసరం.పరీక్ష ఫలితాలు ఉంటే, ఒకే లక్ష్యం ఇప్పటికీ సానుకూలంగా ఉంటే, అది సానుకూలంగా నిర్ణయించబడుతుంది.

(2) నిజ-సమయ ఫ్లోరోసెంట్ RT-PCR యొక్క రెండు నమూనాలు ఒకే సమయంలో ఒకే లక్ష్యాన్ని సానుకూలంగా చూపించాయి లేదా ఒకే రకమైన రెండు నమూనాలు ఒకే లక్ష్య సానుకూల పరీక్ష ఫలితాన్ని చూపించాయి, దీనిని సానుకూలంగా నిర్ధారించవచ్చు.అయినప్పటికీ, న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్ష యొక్క ప్రతికూల ఫలితాలు SARS-CoV-2 సంక్రమణను మినహాయించలేవని కూడా మార్గదర్శకాలు నొక్కి చెబుతున్నాయి.పేలవమైన నమూనా నాణ్యత (ఓరోఫారింక్స్ మరియు ఇతర భాగాల నుండి శ్వాసకోశ నమూనాలు), నమూనా సేకరణ చాలా త్వరగా లేదా చాలా ఆలస్యంగా ఉండటం, నమూనాలను సరిగ్గా నిల్వ చేయడం, రవాణా చేయడం మరియు ప్రాసెస్ చేయడం వంటివి జరగలేదు మరియు సాంకేతికతలోనే సమస్యలు ఉన్నాయి (వైరస్ వైవిధ్యం, PCR నిరోధం) మొదలైనవి తప్పుడు ప్రతికూలతలకు కారణమయ్యే కారకాలు మినహాయించబడాలి.

SARS-CoV-2 గుర్తింపులో తప్పుడు ప్రతికూలతలకు కారణాలు

ప్రస్తుతం ఆందోళన చెందుతున్న న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్షలో “తప్పుడు ప్రతికూలత” అనే భావన తరచుగా “తప్పుడు ప్రతికూలతలను” సూచిస్తుంది, దీనిలో న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్ష ఫలితాలు క్లినికల్ వ్యక్తీకరణలకు భిన్నంగా ఉంటాయి, అంటే క్లినికల్ లక్షణాలు మరియు ఇమేజింగ్ ఫలితాలు COVID-19ని ఎక్కువగా అనుమానించాయి, అయితే న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్షలు ఎల్లప్పుడూ చాలాసార్లు “ప్రతికూలంగా” ఉంటాయి.నేషనల్ హెల్త్ కమిషన్ యొక్క క్లినికల్ లాబొరేటరీ సెంటర్ "తప్పుడు ప్రతికూల" SARS-CoV-2 పరీక్షను వివరించింది.

(1) సోకిన వ్యక్తి యొక్క కణాలలో నిర్దిష్ట మొత్తంలో వైరస్ ఉంటుంది.శరీరం వైరస్ బారిన పడిన తర్వాత, వైరస్ ముక్కు మరియు నోటి ద్వారా గొంతులోకి ప్రవేశించి, ఆపై శ్వాసనాళం మరియు శ్వాసనాళాలకు, ఆపై అల్వియోలీకి చేరుతుందని ఇప్పటికే ఉన్న డేటా చూపిస్తుంది.సోకిన వ్యక్తి పొదిగే కాలం, తేలికపాటి లక్షణాలు, ఆపై తీవ్రమైన లక్షణాల ప్రక్రియ మరియు వ్యాధి యొక్క వివిధ దశలను అనుభవిస్తారు.మరియు శరీరంలోని వివిధ భాగాలలో ఉండే వైరస్ పరిమాణం భిన్నంగా ఉంటుంది.

కణ రకాల వైరల్ లోడ్ పరంగా, అల్వియోలార్ ఎపిథీలియల్ సెల్స్ (దిగువ శ్వాసనాళం)> వాయుమార్గ ఎపిథీలియల్ కణాలు (ఎగువ శ్వాసనాళం)> ఫైబ్రోబ్లాస్ట్‌లు, ఎండోథెలియల్ కణాలు మరియు మాక్రోఫేజెస్ మొదలైనవి;నమూనా రకం నుండి, అల్వియోలార్ లావేజ్ ఫ్లూయిడ్ (అత్యంత అద్భుతమైనది)>లోతైన దగ్గు కఫం>నాసోఫారింజియల్ స్వాబ్>ఓరోఫారింజియల్ స్వాబ్>రక్తం.అదనంగా, వైరస్ మలంలో కూడా గుర్తించవచ్చు.అయితే, ఆపరేషన్ సౌలభ్యం మరియు రోగుల అంగీకారాన్ని పరిగణనలోకి తీసుకుంటే, సాధారణంగా ఉపయోగించే క్లినికల్ నమూనా క్రమం ఒరోఫారింజియల్ స్వాబ్>నాసోఫారింజియల్ స్వాబ్>బ్రోన్చియల్ లావేజ్ ఫ్లూయిడ్ (కాంప్లెక్స్ ఆపరేషన్) మరియు లోతైన కఫం (సాధారణంగా పొడి దగ్గు, పొందడం కష్టం) .

అందువల్ల, కొంతమంది రోగుల యొక్క ఒరోఫారింక్స్ లేదా నాసోఫారెక్స్ యొక్క కణాలలో వైరస్ మొత్తం చిన్నది లేదా చాలా తక్కువగా ఉంటుంది.పరీక్ష కోసం ఓరోఫారెక్స్ లేదా నాసోఫారెక్స్ యొక్క నమూనాలను మాత్రమే తీసుకుంటే, వైరల్ న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ కనుగొనబడదు.

(2) నమూనా సేకరణ సమయంలో వైరస్-కలిగిన కణాలు ఏవీ సేకరించబడలేదు లేదా వైరల్ న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ సమర్థవంతంగా భద్రపరచబడలేదు.

[① సరికాని సేకరణ సైట్, ఉదాహరణకు, ఒరోఫారింజియల్ స్వాబ్‌లను సేకరించేటప్పుడు, సేకరణ లోతు సరిపోదు, సేకరించిన నాసోఫారింజియల్ స్వాబ్‌లు నాసికా కుహరంలో లోతుగా సేకరించబడవు, మొదలైనవి. సేకరించిన చాలా కణాలు వైరస్-రహిత కణాలు కావచ్చు;

②నమూనా స్విబ్‌లు తప్పుగా ఉపయోగించబడ్డాయి.ఉదాహరణకు, PE ఫైబర్, పాలిస్టర్ ఫైబర్ మరియు పాలీప్రొఫైలిన్ ఫైబర్ వంటి సింథటిక్ ఫైబర్‌లు స్వాబ్ హెడ్ యొక్క పదార్థానికి సిఫార్సు చేయబడ్డాయి.పత్తి వంటి సహజ ఫైబర్‌లు వాస్తవ ఆపరేషన్‌లో ఉపయోగించబడతాయి (ప్రోటీన్ యొక్క బలమైన శోషణం మరియు కడగడం సులభం కాదు) మరియు నైలాన్ ఫైబర్‌లు (పేలవమైన నీటి శోషణ, తగినంత నమూనా వాల్యూమ్‌కు దారితీస్తుంది);

③న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలను (DNA/RNA) సులభంగా గ్రహించగలిగే పాలీప్రొఫైలిన్ లేదా పాలిథిలిన్ ప్లాస్టిక్ స్టోరేజ్ ట్యూబ్‌ల దుర్వినియోగం వంటి వైరస్ నిల్వ గొట్టాల సరికాని ఉపయోగం, దీని ఫలితంగా నిల్వ ద్రావణంలో న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం సాంద్రత తగ్గుతుంది.ఆచరణలో, వైరల్ న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలను నిల్వ చేయడానికి పాలిథిలిన్-ప్రొఫైలిన్ పాలిమర్ ప్లాస్టిక్ మరియు కొన్ని ప్రత్యేకంగా చికిత్స చేయబడిన పాలీప్రొఫైలిన్ ప్లాస్టిక్ కంటైనర్లను ఉపయోగించాలని సిఫార్సు చేయబడింది.]

[① సరికాని సేకరణ సైట్, ఉదాహరణకు, ఒరోఫారింజియల్ స్వాబ్‌లను సేకరించేటప్పుడు, సేకరణ లోతు సరిపోదు, సేకరించిన నాసోఫారింజియల్ స్వాబ్‌లు నాసికా కుహరంలో లోతుగా సేకరించబడవు, మొదలైనవి. సేకరించిన చాలా కణాలు వైరస్-రహిత కణాలు కావచ్చు;

②నమూనా స్విబ్‌లు తప్పుగా ఉపయోగించబడ్డాయి.ఉదాహరణకు, PE ఫైబర్, పాలిస్టర్ ఫైబర్ మరియు పాలీప్రొఫైలిన్ ఫైబర్ వంటి సింథటిక్ ఫైబర్‌లు స్వాబ్ హెడ్ యొక్క పదార్థానికి సిఫార్సు చేయబడ్డాయి.పత్తి వంటి సహజ ఫైబర్‌లు వాస్తవ ఆపరేషన్‌లో ఉపయోగించబడతాయి (ప్రోటీన్ యొక్క బలమైన శోషణం మరియు కడగడం సులభం కాదు) మరియు నైలాన్ ఫైబర్‌లు (పేలవమైన నీటి శోషణ, తగినంత నమూనా వాల్యూమ్‌కు దారితీస్తుంది);

③న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలను (DNA/RNA) సులభంగా గ్రహించగలిగే పాలీప్రొఫైలిన్ లేదా పాలిథిలిన్ ప్లాస్టిక్ స్టోరేజ్ ట్యూబ్‌ల దుర్వినియోగం వంటి వైరస్ నిల్వ గొట్టాల సరికాని ఉపయోగం, దీని ఫలితంగా నిల్వ ద్రావణంలో న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం సాంద్రత తగ్గుతుంది.ఆచరణలో, వైరల్ న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలను నిల్వ చేయడానికి పాలిథిలిన్-ప్రొఫైలిన్ పాలిమర్ ప్లాస్టిక్ మరియు కొన్ని ప్రత్యేకంగా చికిత్స చేయబడిన పాలీప్రొఫైలిన్ ప్లాస్టిక్ కంటైనర్లను ఉపయోగించాలని సిఫార్సు చేయబడింది.]

(4) క్లినికల్ లాబొరేటరీ ఆపరేషన్ ప్రామాణికం కాదు.పరీక్ష ఫలితాల ఖచ్చితత్వం మరియు విశ్వసనీయతను నిర్ధారించడానికి నమూనా రవాణా మరియు నిల్వ పరిస్థితులు, క్లినికల్ లాబొరేటరీల యొక్క ప్రామాణికమైన ఆపరేషన్, ఫలితాల వివరణ మరియు నాణ్యత నియంత్రణ కీలక కారకాలు.మార్చి 16-24, 2020 తేదీలలో నేషనల్ హెల్త్ కమిషన్ యొక్క క్లినికల్ లాబొరేటరీ సెంటర్ నిర్వహించిన బాహ్య నాణ్యత మూల్యాంకనం ఫలితాల ప్రకారం, చెల్లుబాటు అయ్యే ఫలితాలను పొందిన 844 ల్యాబొరేటరీలలో 701 (83.1%) అర్హత సాధించాయి మరియు 143 (16.9%) అర్హత సాధించలేదు.అర్హత, మొత్తం ప్రయోగశాల పరీక్ష పరిస్థితులు బాగున్నాయి, అయితే వేర్వేరు ప్రయోగశాలలు ఇప్పటికీ సిబ్బంది నిర్వహణ సామర్థ్యం, ​​సింగిల్-టార్గెట్ సానుకూల నమూనా వివరణ సామర్థ్యం మరియు నాణ్యత నియంత్రణలో తేడాలను కలిగి ఉన్నాయి.

SARS-CoV-2 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ గుర్తింపు యొక్క తప్పుడు ప్రతికూలతను ఎలా తగ్గించాలి?

న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ గుర్తింపులో తప్పుడు ప్రతికూలతలను తగ్గించడం తప్పుడు ప్రతికూలతలను ఉత్పత్తి చేసే నాలుగు అంశాల నుండి ఆప్టిమైజ్ చేయాలి.

(1) సోకిన వ్యక్తి యొక్క కణాలలో నిర్దిష్ట మొత్తంలో వైరస్ ఉంటుంది.అనుమానిత వ్యాధిగ్రస్తుల శరీరంలోని వివిధ భాగాలలో వైరస్ యొక్క గాఢత వేర్వేరు సమయాల్లో భిన్నంగా ఉంటుంది.ఫారింక్స్ లేకపోతే, అది బ్రోన్చియల్ లావేజ్ ఫ్లూయిడ్ లేదా మలంలో ఉండవచ్చు.అనేక రకాల నమూనాలను ఒకే సమయంలో లేదా వ్యాధి పురోగతి యొక్క వివిధ దశల్లో పరీక్ష కోసం సేకరించగలిగితే, తప్పుడు ప్రతికూలతలను నివారించడంలో సహాయపడుతుంది.

(2) నమూనా సేకరణ సమయంలో వైరస్ ఉన్న కణాలను సేకరించాలి.నమూనా కలెక్టర్ల శిక్షణను బలోపేతం చేయడం ద్వారా ఈ సమస్యను చాలా వరకు పరిష్కరించవచ్చు.

(3) విశ్వసనీయ IVD కారకాలు.జాతీయ స్థాయిలో రియాజెంట్ల గుర్తింపు పనితీరు మూల్యాంకనంపై పరిశోధన చేయడం ద్వారా మరియు ఇప్పటికే ఉన్న సమస్యలను చర్చించడం ద్వారా, కారకాల గుర్తింపు సామర్థ్యాన్ని మరింత మెరుగుపరచవచ్చు మరియు విశ్లేషణ యొక్క సున్నితత్వాన్ని మెరుగుపరచవచ్చు.

(4) క్లినికల్ లాబొరేటరీల ప్రామాణికమైన ఆపరేషన్.ప్రయోగశాల సిబ్బందికి శిక్షణను బలోపేతం చేయడం ద్వారా, ప్రయోగశాల నాణ్యత నిర్వహణ వ్యవస్థను నిరంతరం మెరుగుపరచడం, సహేతుకమైన విభాగాలను నిర్ధారించడం మరియు గుర్తించే సిబ్బంది సామర్థ్యాన్ని మెరుగుపరచడం ద్వారా, సరికాని ప్రయోగశాల కార్యకలాపాల కారణంగా తప్పుడు ప్రతికూలతలను తగ్గించడం సాధ్యమవుతుంది.

కోలుకున్న మరియు డిశ్చార్జ్ అయిన రోగులలో SARS-CoV-2 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్ష యొక్క రీ-టెస్ట్ పాజిటివ్‌కి కారణాలు

“COVID-19 నిర్ధారణ మరియు చికిత్స ప్రణాళిక (ట్రయల్ సెవెంత్ ఎడిషన్)” COVID-19 రోగులను నయం చేయడానికి మరియు ఆసుపత్రి నుండి డిశ్చార్జ్ చేయడానికి ప్రమాణాలలో ఒకటి, వరుసగా రెండు రెస్పిరేటరీ ట్రాక్ట్ శాంపిల్స్‌లో నెగిటివ్ న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్ష (కనీసం 24 గంటల వ్యవధిలో పాజిటివ్ న్యూక్లియైక్ యాసిడ్ పరీక్ష రోగులకు 24 గంటల వ్యవధిలో) అని స్పష్టంగా నిర్దేశిస్తుంది. వివిధ కారణాల వలన.

(1)SARS-CoV-2 ఒక కొత్త వైరస్.దాని వ్యాధికారక యంత్రాంగం, సంభవించిన వ్యాధి యొక్క పూర్తి చిత్రాన్ని మరియు వ్యాధి కోర్సు యొక్క లక్షణాలను మరింత అర్థం చేసుకోవడం అవసరం.అందువల్ల, ఒక వైపు, డిశ్చార్జ్ చేయబడిన రోగుల నిర్వహణను బలోపేతం చేయడం మరియు 14 రోజుల వైద్య పరిశీలనను నిర్వహించడం అవసరం.వ్యాధి సంభవం, అభివృద్ధి మరియు ఫలితం యొక్క మొత్తం ప్రక్రియ యొక్క అవగాహనను మరింత లోతుగా చేయడానికి ఫాలో-అప్, ఆరోగ్య పర్యవేక్షణ మరియు ఆరోగ్య మార్గదర్శకాలను నిర్వహించండి.

(2) రోగి మళ్లీ వైరస్ బారిన పడవచ్చు.విద్యావేత్త జాంగ్ నాన్షాన్ ఇలా అన్నారు: నయమైన రోగులకు ప్రతిరోధకాలు ఉన్నందున, SARS-CoV-2 వారు మళ్లీ దాడి చేసినప్పుడు ప్రతిరోధకాల ద్వారా తొలగించబడవచ్చు.అనేక కారణాలు ఉన్నాయి, అవి కోలుకున్న రోగికి కారణం కావచ్చు లేదా వైరస్ యొక్క మ్యుటేషన్‌కు సంబంధించినది కావచ్చు లేదా ప్రయోగశాల పరీక్షకు కూడా కారణం కావచ్చు.ఇది వైరస్ అయితే, SARS-CoV-2 మ్యుటేషన్ కోలుకున్న రోగి ద్వారా ఉత్పత్తి చేయబడిన యాంటీబాడీ పరివర్తన చెందిన వైరస్‌కు వ్యతిరేకంగా పనికిరాకుండా పోతుంది.రోగి మళ్లీ పరివర్తన చెందిన వైరస్ బారిన పడినట్లయితే, న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్ష మళ్లీ సానుకూలంగా ఉండవచ్చు.

(3) ప్రయోగశాల పరీక్షా పద్ధతులకు సంబంధించినంతవరకు, ప్రతి పరీక్షా పద్ధతికి దాని పరిమితులు ఉన్నాయి.SARS-CoV-2 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ గుర్తింపు అనేది జన్యు శ్రేణి ఎంపిక, రియాజెంట్ల కూర్పు, పద్ధతి యొక్క సున్నితత్వం మరియు ఇతర కారణాల వల్ల, ఇప్పటికే ఉన్న కిట్‌లు వాటి స్వంత తక్కువ గుర్తింపు పరిమితులను కలిగి ఉంటాయి.రోగికి చికిత్స చేసిన తర్వాత, శరీరంలో వైరస్ తగ్గుతుంది.పరీక్షించాల్సిన నమూనాలోని వైరల్ లోడ్ గుర్తించే తక్కువ పరిమితి కంటే తక్కువగా ఉన్నప్పుడు, “ప్రతికూల” ఫలితం కనిపిస్తుంది.అయితే, ఈ ఫలితం శరీరంలోని వైరస్ పూర్తిగా అదృశ్యమైందని అర్థం కాదు.చికిత్స నిలిపివేయబడిన తర్వాత వైరస్ ఉండవచ్చు.పునరుజ్జీవనం”, కాపీ చేయడం కొనసాగించండి.అందువల్ల, డిశ్చార్జ్ తర్వాత 2 నుండి 4 వారాలలోపు వారానికి ఒకసారి సమీక్షించాలని సిఫార్సు చేయబడింది.

(4) న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం వైరస్ యొక్క జన్యు పదార్థం.రోగి యాంటీవైరల్ చికిత్స పొందిన తర్వాత వైరస్ చంపబడుతుంది, అయితే మిగిలిన వైరల్ RNA శకలాలు ఇప్పటికీ మానవ శరీరంలో అలాగే ఉంచబడతాయి మరియు శరీరం నుండి పూర్తిగా విడుదల చేయబడవు.కొన్నిసార్లు, కొన్ని పరిస్థితులలో, అది మరింత నిలుపుకోవచ్చు.చాలా కాలం, మరియు ఈ సమయంలో న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్ష "తాత్కాలిక" సానుకూలంగా ఉంటుంది.రోగి రికవరీ సమయం పొడిగించడంతో, శరీరంలోని అవశేష RNA శకలాలు క్రమంగా అయిపోయిన తర్వాత, న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్ష ఫలితం ప్రతికూలంగా మారవచ్చు.

(5) SARS-CoV-2 యొక్క న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్ష ఫలితం వైరల్ RNA ఉనికిని లేదా లేకపోవడాన్ని మాత్రమే రుజువు చేస్తుంది మరియు వైరస్ యొక్క కార్యాచరణను మరియు వైరస్ వ్యాప్తి చెందుతుందా అని నిరూపించలేదు.పాజిటివ్ న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్షను కలిగి ఉన్న రోగి మళ్లీ ఇన్ఫెక్షన్‌కు మూలంగా మారుతుందో లేదో నిరూపించాల్సిన అవసరం ఉంది.క్లినికల్ శాంపిల్స్‌పై వైరస్ సంస్కృతిని నిర్వహించడం మరియు అది అంటువ్యాధి అని నిరూపించడానికి “లైవ్” వైరస్‌ను పండించడం అవసరం.

సారాంశం

సారాంశంలో, SARS-CoV-2 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్ష తప్పుడు ప్రతికూలతలు, రీటెస్ట్ పాజిటివ్‌లు మరియు క్లినికల్ వ్యక్తీకరణలకు విరుద్ధంగా ఉండే ఇతర పరిస్థితులను పూర్తిగా నివారించలేము.వాస్తవ స్క్రీనింగ్ మరియు పరీక్షలో, తప్పిపోయిన రోగ నిర్ధారణ మరియు తప్పు నిర్ధారణను నివారించడానికి సమగ్ర రోగ నిర్ధారణ కోసం క్లినికల్ లక్షణాలు, ఇమేజింగ్ పరీక్షలు (CT) మరియు ప్రయోగాలు ప్రయోగశాల పరీక్ష (న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్ష + వైరస్-నిర్దిష్ట యాంటీబాడీ పరీక్ష) ఫలితాలను మిళితం చేయాలని సిఫార్సు చేయబడింది.పరీక్ష ఫలితాలు క్లినికల్ వ్యక్తీకరణలకు విరుద్ధంగా ఉన్నట్లు గుర్తించినట్లయితే, SARS-CoV-2 వైరస్ ప్రారంభ ఇన్‌ఫెక్షన్, పునరావృత సంక్రమణ లేదా ఇతర శ్వాసకోశ వైరస్ ఇన్‌ఫెక్షన్‌లతో కలిపి, మొదలైన వాటిని మినహాయించడానికి మొత్తం పరీక్ష లింక్ (నమూనా సేకరణ, ప్రసరణ మరియు ప్రాసెసింగ్ లింక్‌లు) యొక్క సమగ్ర విశ్లేషణను నిర్వహించాలని సిఫార్సు చేయబడింది.పరిస్థితులు అనుమతిస్తే, పునఃపరిశీలన కోసం కఫం లేదా అల్వియోలార్ లావేజ్ ద్రవం వంటి మరింత సున్నితమైన నమూనాలను సేకరించాలని సిఫార్సు చేయబడింది.

సంబంధిత ఉత్పత్తులు:

SARS-CoV-2 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ డిటెక్షన్ కిట్ (మల్టీప్లెక్స్ PCR ఫ్లోరోసెంట్ ప్రోబ్ మెథడ్)